[发明专利]用shRNA有效干扰家蚕CREB基因表达的方法无效

专利信息
申请号: 201410000451.5 申请日: 2014-01-02
公开(公告)号: CN103757052A 公开(公告)日: 2014-04-30
发明(设计)人: 宋红生;张鸿雁;樊宗标;杜腾飞;黄延旺;赵怡姣;潮梦凌 申请(专利权)人: 上海大学
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/113;G01N33/68
代理公司: 上海上大专利事务所(普通合伙) 31205 代理人: 何文欣
地址: 200444*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种有效干扰家蚕CREB基因表达的方法。该方法的具体步骤为:将干扰家蚕CREB基因表达的靶序列与家蚕的U6启动子插入pMD18T载体,构建适合在家蚕中表达的pMD18T-U6-shRNA质粒,将该质粒用脂质体转染方法转染家蚕卵巢细胞系(BmN)71~73小时后,用Westernblot方法检测CREB蛋白表达量。用CREB基因的5’-GGTGCAGTCTGTTATTCAACCT-3’构建的shRNA干扰质粒能使的家蚕CREB蛋白的表达量下降50%以上。发明从技术层面为利用shRNA方法下调CREB基因表达提供了有效的靶点。
搜索关键词: shrna 有效 干扰 家蚕 creb 基因 表达 方法
【主权项】:
一种用shRNA有效干扰家蚕CREB基因表达的方法,其特征在于,操作步骤如下: (1)shRNA干扰质粒载体的构建;(2)用脂质体转染家蚕BmN细胞系;(3)用Western blot检测CREB蛋白表达量。
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