[发明专利]一种多花黑麦草组培快繁方法

摘要

本发明属于植物生物学领域，具体涉及一种多花黑麦草组培快繁方法。包括无菌实生苗的制备、无根系无菌分蘖丛生芽的制备、有根系无菌实生苗的制备和移栽，本发明所需仪器简单，成本低廉，提高了经济效益。本发明所构建的种子发芽培养、分蘖丛生芽培养、生根培养和成苗移栽黑麦草组培苗快繁体系，能在2个月到3个月之间成苗，且提高了成活率，适用于规模化的生产。本发明通过采用茎基进行培养，大大提高了组培苗的成活率，缩短了培养周期。且本发明通过采用茎基进行培养大大扩展了多花黑麦草的组织培养取材范围，促进了多花黑麦草组织培养的发展，使其更广泛的用于规模化生产。

主权项

一种多花黑麦草组培快繁方法，包括无菌实生苗的制备、无根系无菌分蘖丛生芽的制备、有根系无菌实生苗的制备和移栽，其特征在于：所述无根系无菌分蘖丛生芽的制备方法为：在超净工作台内，选取健壮的无菌实生苗，并将其置于无菌培养皿中，在无菌条件下先剪去无菌实生苗的根系，然后在根茎结合处向上1cm的位置切割，得到茎基，将得到的茎基放于组培瓶内的生芽培养基表面，然后轻压，使根部没入生芽培养基中，然后盖紧组培瓶盖子；再将组培瓶置于温度为23～27℃，光照时间为16h/d，光强为1500~2000Lx的光照培养箱中培养20~35天后，单个茎基萌发出高6~10cm，数量为8~20个的分蘖丛生芽，得分蘖丛生芽，然后从中选取数量为18~48个的分蘖丛生芽作为无根系无菌分蘖丛生芽；所述有根系无菌实生苗的制备方法为：在超净工作台内，取出制得的无根系无菌分蘖丛生芽，并置于无菌培养皿中，用灭菌过的医用手术刀切除丛生芽上部的多余叶片，留下长2~3cm的丛生芽，然后在分蘖节处纵向切割，将其分割成完整的单芽，然后将单芽根部向下轻放于组培瓶内的生根培养基表面，轻压使其根部没入培养基中，接种完后盖紧瓶盖，将接种后的组培瓶置于温度为23～27℃，光照时间为16h/d，光照强度为1500~2000Lx的光照培养箱中培养15~25天后，幼苗基部长出6~10根须根，得无菌实生苗。