[发明专利]一种抗寒香蕉种质的筛选方法

摘要

本发明属于香蕉愈伤组织辐射诱变育种领域，具体涉及一种抗寒香蕉种质的筛选方法，利用该方法能高效快速筛选香蕉抗寒突变种质。发明包括香蕉未成熟雄花愈伤组织的辐射处理、愈伤组织低温筛选、分化芽低温筛选、香蕉幼苗低温筛选、香蕉抗寒生根苗驯化及移栽等内容组成。本方法由于采用了三次低温筛选技术，尤其是在香蕉雄花诱导的愈伤组织时期就开始采用低温筛选技术，极大的提高了抗寒突变种质的筛选效率，缩短了培育香蕉抗寒品种的周期。

主权项

一种抗寒香蕉种质的筛选方法，其特征包括以下步骤：1)、香蕉未成熟雄花愈伤组织的辐射处理香蕉未成熟雄花诱导的愈伤组织经60Co‑γ射线辐射处理，愈伤组织辐射吸收剂量为60‑70Gy；2)、愈伤组织低温筛选经过辐射处理的愈伤组织转入人工气候箱进行黑暗培养，设置人工气候箱温度为14℃、10℃二个温度梯度，采用先高温后低温的原则，每个温度处理时间周期为10天，进行低温筛选，在10℃低温筛选阶段结束后逐步恢复温度至26℃，选择经过低温筛选后成活的愈伤组织进行分化培养；3)、愈伤组织的分化培养经过低温筛选后成活的愈伤组织接种于分化固体培养基上，连续培养20‑30天产生分化芽；4)、分化芽低温筛选分化芽转入人工气候箱，设置人工气候箱光强度为1500lx，每天光培养12小时，黑暗培养12小时，设置人工气候箱温度为14℃、10℃、7℃三个温度梯度，采用先高温后低温的原则，每个温度处理时间周期为14天，进行低温筛选，在7℃低温筛选阶段结束后逐步恢复温度至26℃，选择经过低温筛选后成活的分化芽，在26℃培养21天，分化芽生长成香蕉幼苗；5)、香蕉幼苗低温筛选将香蕉幼苗转入人工气候箱，设置人工气候箱光强度为1700lx，每天光培养18小时，黑暗培养6小时，设置人工气候箱温度为14℃、10℃、7℃、4℃四个温度梯度，采用先高温后低温的原则，每个温度处理时间周期为10天，进行香蕉幼苗低温筛选，在4℃低温筛选阶段结束后逐步恢复温度至26℃，选择经过低温筛选后成活的香蕉幼苗，将香蕉幼苗接种于生根培养基上，连续培养30天，诱导出较高质量的根系，成为香蕉抗寒生根苗；6)、香蕉抗寒生根苗驯化及移栽香蕉抗寒生根苗经2‑3天的自然光炼苗后，洗净根部培养基，移栽于营养袋中，在大棚育苗2‑3个月，再移栽入大田定植，做为抗寒香蕉种质保存。