[发明专利]一种木质纤维素类物质联产生物乙醇和普鲁兰糖的方法

摘要

本发明公开了一种利用木质纤维素类物质联产生物乙醇和普鲁兰糖的方法。纤维素类物质经碱法预处理、木聚糖酶酶解，固液分离后分别得到半纤维素水解液（木糖液）和固相残渣。固相残渣再经木质素提取后得纤维素残渣。木糖液直接用于普鲁兰糖发酵生产（得率≥0.29g普鲁兰糖/g木糖），纤维素残渣进行同步糖化发酵生产乙醇。含普鲁兰糖发酵液使用纤维残渣发酵蒸馏所得乙醇进行醇沉，提取精制得普鲁兰糖产品，纯化过程中产生的含乙醇废液与纤维素残渣乙醇发酵液合并，经蒸馏实现乙醇的回收利用。本发明可实现半纤维素和纤维素的充分利用和高值转化，并且能够节约利用资源，达到保护环境和提升经济效益的目的。

主权项

一种木质纤维素类物质联产生物乙醇和普鲁兰糖的方法，包括如下步骤：第一、半纤维素水解液制备：纤维类物质原料除杂、粉碎至20～30目后，按固液比为1:12～1:15的量加入0.5～0.8%的NaOH溶液，40℃条件下预处理1～3h；将预处理后的纤维素类物质洗至中性，按固液比1:15～1:18将原料投入pH4.5～5.5的酶解缓冲水溶液中，按100～200IU/g原料加入市售木聚糖酶，同时添加表面活性剂RH0.005～0.01%、Tween‑800.15～0.35%、PEG60000.2～0.35%、Triton X‑100（曲拉通X‑100）0.1～0.30%、并于38～40℃条件下酶解36～72h，将酶解体系进行固液分离，得半纤维素水解液和固相残渣；第二、木质素的提取与纤维素残渣制备：将第一步所得固相残渣按照固液比为1:12～1:18的比例加入木质素提取混合液，温度为80～90℃，反应时间为2～4h；木质素提取之后的残渣即为纤维素残渣；第三、半纤维素水解液普鲁兰糖发酵：将第一步得到的半纤维素水解液蒸发浓缩，调整初始糖浓度，补充硫酸铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钠、酵母浸粉后，将出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）CGMCC No.7154种子液体按5‑10%接种量接入到发酵罐中，培养温度26～28℃，转速200～400r/min，通气量1.0～2.5vvm，pH控制在5.0～5.5，罐压0.02～0.03Mpa，培养24h后加入二硫苏糖醇至浓度为1.0～2.0mM；发酵过程通过流加混合氮源控制溶氧，当溶氧水平上升到60～70%以上时，向发酵罐中添加适量的混合氮源，使得溶氧水平降至40～45%以下，培养7d结束发酵；发酵液分离醇沉再分离获得普鲁兰糖粗品；第四、纤维素残渣同步糖化发酵生产乙醇：向纤维素残渣中补充营养物质KH2PO4、硫酸铵、酵母浸粉添加市售纤维素酶，2～5%酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCC2.0119种子液和0.5‑1%CGMCC No.7377种子液，于30‑35℃发酵15‑20‑小时，随后提高温度到38‑41℃，继续发酵30‑40小时结束发酵；所得发酵液经蒸馏后得到乙醇；第五、将第三步所得的含有乙醇的废液和第四步所得的含有乙醇的发酵液混合，蒸馏法回收利用乙醇。