[发明专利]一种α-地中海贫血荧光定量PCR检测试剂盒及其应用

摘要

本发明涉及一种α-地中海贫血荧光定量PCR检测试剂盒。该试剂盒包括用于检测SEA、4.2和3.7型缺失的探针、用于扩增SEA、4.2和3.7型缺失的上游引物以及下游引物、PCR缓冲液和酶混合液。该试剂盒操作简便，灵敏度高，并可预防PCR产物污染，具有很好的特异性、重复性和稳定性，利用该试剂盒进行α-地中海贫血荧光定量PCR检测，可以确定外周血样本中α-地中海贫血的缺失类型，可为灵敏、早期诊断α-地中海贫血缺失类型提供可靠的实验证据。

主权项

一种α‑地中海贫血荧光定量PCR检测试剂盒，其包括3种PCR反应液，所述3种PCR反应液中均含有用于靶多核苷酸扩增和检测的引物和探针，其中，PCR反应液Ⅰ：含有源于人基因组16号染色体α1和α2基因的保守区域的用于检测α‑地中海贫血SEA缺失的引物和探针，且所述引物和探针的序列为，上游引物α‑SEA‑F：5’‑TCAGCCACCCGCAGACCAAGACCTA‑3’；下游引物α‑SEA‑R：5’‑AGACAGCGTCACCCTCAGAGCCAT‑3’；探针α‑SEA‑P：5’‑AAATGGATGAGGACGGAGCGATCTG‑3’；PCR反应液Ⅱ：含有源于人基因组16号染色体α1基因的保守区域的用于检测α‑地中海贫血3.7缺失的引物和探针，且所述引物和探针的序列为，上游引物α‑3.7‑F：5’‑GGGGTGTCACAGTGAACCACGACC‑3’；下游引物α‑3.7‑R：5’‑GCCCCTGCCTTTTCCTACCCTATCC‑3’；探针α‑3.7‑P：5’‑TGCGTCCTGGTGTTTGTTCCTTCCC‑3’；PCR反应液Ⅲ：含有源于人基因组16号染色体α2基因的保守区域的用于检测α‑地中海贫血4.2缺失的引物和探针，且所述引物和探针的序列为，上游引物α‑4.2‑F：5’‑GGCAGCCTTGGGCAACCTGTCTAC‑3’；下游引物α‑4.2‑R：5’‑GGGCGGCTCCAGATTCAGACTCCT‑3’；探针α‑4.2‑P：5’‑GCAGCCTTGGGCAACCTGTCTAC‑3’。