[发明专利]一种同时测定16种人参皂苷单体HPLC方法

摘要

本发明提供一种同时测定Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、protopanaxatriol、Compound K、Rh2、protopanaxadiol16种人参皂苷单体HPLC方法，测定范围包括含有上述1种以上皂苷单体的人参、西洋参等药用植物及其制剂；与现有技术相比，本发明同时测定的人参皂苷单体种类多达16种，提高了效率；本发明只用乙腈和水作流动相，解决了磷酸盐对色谱柱损耗大,系统清洗麻烦等问题；本发明建立的HPLC方法线性范围广、方法准确、重现性好、快捷简便、稳定可靠。本发明为人参、西洋参等药用植物及其制剂的质量控制提供理论依据。

主权项

一种同时测定16种人参皂苷单体HPLC方法，所测定的16种人参皂苷单体分别为Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、protopanaxatriol、Compound K、Rh2、protopanaxadiol，测定样品范围包括含有上述皂苷中1种以上的人参、西洋参等药用植物及其制剂；由以下步骤完成：（1）对照品溶液的制备 分别精密称取16种人参皂苷单体对照品Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rb3、F1、Rd、F2、Rg3、protopanaxatriol、CK、Rh2、protopanaxadiol 5mg，至于5ml容量瓶，用甲醇溶解并定容，制得1mg﹒ml^‑1的溶液；（2）样品溶液的制备 分为固体样品和液体样品两种：精密称取固体样品人参及其制剂粉末1g，用滤纸包好，放置索氏提取器中，加适量石油醚，80℃回流提取4h，弃去石油醚液，加适量甲醇，80℃回流提取10h，收集提取液,加色谱纯甲醇定容，用0.45μm滤膜过滤入样品瓶备用；液体样品直接用0.45μm滤膜过滤入样品瓶备用。（3）16种人参皂苷单体含量测定标准曲线的建立 色谱条件：C18色谱柱为150×4.6mm，5μm；流动相为乙腈和水，流动相梯度洗脱条件：0min为18%乙腈，40min为21%乙腈，42min为26%乙腈，46min为32%乙腈，66min为33.5% 乙腈，71min为38%乙腈，86min为65%乙腈， 91min为65%乙腈，96min为85%乙腈，103min为85%乙腈，105min为18%乙腈，106min为18%乙腈；流速1.0 mL·min^‑1；检测波长 203 nm，柱温35℃；将1.0mg﹒ml^‑1的对照品溶液进样2uL，4uL，6uL，10uL,16uL,20uL,建立标准曲线，计算每个皂苷单体线性回归方程；（4）样品中人参皂苷含量的测定 按上述标准曲线色谱条件对制备的样品溶液进行测定，制备的样品溶液进样量为20uL,利用线性回归方程，计算样品中16种人参皂苷含量。