[发明专利]紫花苜蓿胚根直接用于PCR反应的制备方法及其试剂盒无效
| 申请号： | 201410023097.8 | 申请日： | 2014-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN103773869A | 公开（公告）日： | 2014-05-07 |
| 发明（设计）人： | 刘志鹏;马利超;罗栋;王彦荣;陈天龙 | 申请（专利权）人： | 兰州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人： | 张真 |
| 地址： | 730000 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明主要涉及一种紫花苜蓿胚根直接用于PCR反应的方法。具体涉及紫花苜蓿胚根根尖经碱处理后，直接作为PCR模板进行SSR反应的方法。一种紫花苜蓿胚根作为PCR模板直接用于SSR反应的方法，其主要特点是包括有：紫花苜蓿胚根根尖经0.25M NaOH水溶液100℃水浴条件下处理40s，之后加入400μl0.25M HCl和200μl0.5M Tris-HCl(pH8.0)，再次100℃沸水中孵育3min，处理过的根尖可直接作为PCR模板进行SSR反应。检测结果表明，该技术具有灵敏性强、准确率高、重复性强和快速便捷等特点，尤其是在受测群体较大时，此种方法更显得经济有效。 | ||
| 搜索关键词： | 紫花苜蓿 胚根 直接 用于 pcr 反应 制备 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种紫花苜蓿胚根直接用于PCR反应的制备方法，其特征是包括如下步骤：A.紫花苜蓿种子采用双层滤纸萌发法，在25℃萌发72h，切取1‑3mm长胚根根尖备用；B.将A步骤中切好的胚根根尖放入含400μl0.25M NaOH的Eppendorf管中，将此离心管插入100℃沸水中煮40s，取出并加入400μl0.25M HCl和200μl0.5M Tris‑HCl pH8.0，再次将该管放入100℃沸水中孵育3min，经过上述碱处理的紫花苜蓿胚根根尖直接作为PCR模板进行SSR反应。
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