[发明专利]一种猪精原干细胞的分离方法有效
| 申请号： | 201410024689.1 | 申请日： | 2014-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN103805560A | 公开（公告）日： | 2014-05-21 |
| 发明（设计）人： | 赵会敏;卢克焕;卢盛晟;陆阳清;杨小淦;杨欢;李敏霞;张飒 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C12N5/076 | 分类号： | C12N5/076 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人： | 彭晓玲 |
| 地址： | 530001 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 一种猪精原干细胞的分离方法，包括溶液配制和精原干细胞的分离，所述的溶液配制包括培养液、消化酶液、缓冲液、胶原溶液、明胶溶液、层粘蛋白溶液的配制，所述的精原干细胞的分离是将猪睾丸组织剪碎后加酶进行消化，细胞筛过滤后进行精原干细胞增殖培养，差异贴壁培养，最后收集精原干细胞，所述的差异贴壁培养包括胶原包被贴壁培养和层粘连蛋白包被贴壁培养，其特征在于：所述的培养液由DMEM/F12、FBS、丙酮酸钠、青霉素、链霉素组成；所述的胶原包被贴壁培养是将细胞培养至所需时间后吹打，然后继续培养。本发明在胶原包被贴壁培养过程中轻轻吹打，避免精原干细胞在胶原上贴壁，减少精原干细胞的丢失，提高了精原干细胞收率。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 干细胞 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种猪精原干细胞的分离方法，包括溶液配制和精原干细胞的分离，所述的溶液配制包括培养液、消化酶液、缓冲液、胶原溶液、明胶溶液、层粘蛋白溶液的配制，所述的精原干细胞的分离是将猪睾丸组织剪碎后加酶进行消化，细胞筛过滤后进行精原干细胞增殖培养，差异贴壁培养，最后收集精原干细胞，所述的差异贴壁培养包括胶原包被贴壁培养和层粘连蛋白包被贴壁培养，其特征在于：所述的培养液由DMEM/F12、FBS、丙酮酸钠、青霉素、链霉素组成；所述的胶原包被贴壁培养是将细胞培养至所需时间后吹打，然后继续培养。
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