[发明专利]四种常见人疱疹病毒荧光定量PCR检测试剂盒

摘要

本发明提供一种同时检测常见人疱疹病毒HSV-1、HSV-2、EBV和HCMV的实时荧光定量PCR试剂盒，由定量PCR反应液、定量反应液、HSV-1标准品、HSV-2标准品、EBV标准品、HCMV标准品、阴性对照品、HSV-1阳性对照品、HSV-2阳性对照品、EBV阳性对照品、HCMV阳性对照品、说明书和盒体组成。本发明试剂盒采用实时荧光定量PCR技术和同一反应体系中双特异荧光探针，检测范围涵盖最常见的四种人疱疹病毒，对样品中的四种人疱疹病毒能进行同时分型检测，能实时准确定量，可满足早期、快速、准确诊断的需要，为流行病学调查和及时制定针对性治疗方案提供有力依据。

主权项

四种常见人疱疹病毒荧光定量PCR检测试剂盒，所述常见人疱疹为HSV‑1、HSV‑2、EBV和HCMV，该检测试剂盒由定量PCR反应液（1）、定量反应液（2）、HSV‑1标准品（3）、HSV‑2标准品（4）、EBV标准品（5）、HCMV标准品（6）、阴性对照品（7）、HSV‑1阳性对照品（8）、HSV‑2阳性对照品（9）、EBV阳性对照品（10）、HCMV阳性对照品（11）、说明书（12）和盒体（13）组成；其中定量PCR反应液含有PCR缓冲液、MgCl₂、dNTPs、耐热DNA聚合酶、通用上游扩增引物、通用下游扩增引物、HSV‑1荧光探针和HSV‑2荧光探针，定量反应液含有PCR缓冲液、MgCl₂、dNTPs、耐热DNA聚合酶、通用上游扩增引物、通用下游扩增引物、EBV下游扩增引物、EBV荧光探针和HCMV荧光探针，通用上游扩增引物：5’‑TCATCTACGGGGACACGGAC‑3’，通用下游扩增引物：5’‑CGCACCAGATCCACGCCCTT‑3’，EBV下游扩增引物：5’‑GAGCTCCACCCCCTTCATC‑3’，HSV‑1荧光探针：5’FAM‑GCGGCACAGCACAAAGATG‑BHQ‑1‑3’，HSV‑2荧光探针：5’HEX‑GCGGCACAAAACGAAAATG‑BHQ‑1‑3’，EBV荧光探针：5’FAM‑ GCACTCGATAAACAGCGAG‑BHQ‑1‑3’，HCMV荧光探针：5’HEX‑ GAAAGCGGACAAACACGCT‑BHQ‑1‑3’，HSV‑1标准品序列为：TCATCTACGG GGACACGGAC TCCATCTTTG TGCTGTGCCG CGGCCTCACG GCCGCCGGGC TGACGGCCGT GGGCGACAAG ATGGCGAGCC ACATCTCGCG CGCGCTGTTT CTGTCCCCCA TCAAACTCGA GTGCGAAAAG ACGTTCACCA AGCTGCTGCT GATCGCCAAG AAAAAGTACA TCGGCGTCAT CTACGGGGGT AAGATGCTCA TCAAGGGCGT GGATCTGGTG CG，HSV‑2标准品序列为：TCATCTACGG GGACACGGAC TCCATTTTCG TTTTGTGCCG CGGCCTCACG GCCGCGGGCC TGGTGGCCAT GGGCGACAAG ATGGCGAGCC ACATCTCGCG CGCGCTGTTC CTCCCCCCGA TCAAGCTCGA GTGCGAAAAA ACGTTCACCA AGCTGCTGCT CATCGCCAAG AAAAAGTACA TCGGCGTCAT CTGCGGGGGC AAGATGCTCA TCAAGGGCGT GGATCTGGTG CG，EBV标准品序列为：TCATCTACGG GGACACGGAC TCGCTGTTTA TCGAGTGCCG GGGGTTTTCA GAGAGCGAGA CCCTGCGCTT TGCCGAGGCC CTGGCCGCCC ACACCACCCG GAGCCTGTTT GTGGCCCCCA TCTCCCTGGA GGCCGAGAAG ACCTTCTCCT GCCTGATGCT GATTACAAAG AAGAGATATG TGGGGGTGCT GACGGACGGC AAGACCCTGA TGAAGGGGGT GGAGCTC，HCMV标准品序列为：TCATCTACGG GGACACGGAC AGCGTGTTTG TCCGCTTTCG TGGCCTGACG CCGCAGGCTC TGGTGGCGCG TGGGCCCAGC CTGGCGCACT ACGTGACGGC CTGTCTTTTT GTGGAGCCCG TCAAGCTGGA GTTTGAAAAG GTCTTCGTCT CTCTTATGAT GATCTGCAAG AAACGTTACA TCGGCAAAGT GGAGGGCGCC TCGGGTCTGA GCATGAAGGG CGTGGATCTG GTGCG。