[发明专利]一种青虾眼柄RNA的提取方法在审
申请号: | 201410030427.6 | 申请日: | 2014-01-23 |
公开(公告)号: | CN103773758A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 江丰伟;傅洪拓;乔慧;张文宜;蒋速飞;熊贻伟;龚永生;金舒博 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李纪昌;曹翠珍 |
地址: | 214081 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种青虾眼柄RNA的提取方法,先将青虾眼柄组织放入RNA保存液中,将眼柄色素部分夹破、漂洗;再将处理后的眼柄组织放入装有RNA保存液的离心管中漂洗后离心;再取眼柄组织放入DEPC水中漂洗后在液氮中将其研磨成粉末,然后加入RNAisoPlus,混合均匀后离心;然后取上清液,加入氯仿,震荡后静置、离心;再取水相加入异丙醇,静置后离心,弃上清;在所得沉淀中加入乙醇,离心后将所得沉淀干燥,再用DEPC水溶解,即得青虾眼柄RNA。本发明消除了RNA提取过程中色素的干扰和降解,步骤简便,成本低廉,克服了常规方法提取青虾眼柄RNA质量不能保证的问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 青虾 rna 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种青虾眼柄RNA的提取方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤1,取青虾眼柄组织放入RNA保存液中,将眼柄色素部分夹破、漂洗;步骤2,将经过步骤1处理所得的眼柄组织放入装有RNA保存液的离心管中漂洗后离心,去掉上清液,取眼柄组织;步骤3,将步骤2所得眼柄组织放入DEPC水中漂洗后在液氮中将其研磨成粉末,然后加入RNAiso Plus,混合均匀后离心,取上清液;步骤4,在步骤3所得上清液中加入氯仿,所述氯仿的体积是上清液的1/5,震荡后静置、离心,取水相;步骤5,在步骤4所得水相中加入等体积的异丙醇,静置后离心,弃上清,保留沉淀;步骤6,在步骤5所得沉淀中加入乙醇,离心后将所得沉淀干燥,再用DEPC水溶解,即得青虾眼柄RNA。
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