[发明专利]一种蛋黄油中胆固醇的含量测定方法

摘要

本发明公开了一种蛋黄油中胆固醇的含量测定方法。本发明的含量测定方法包括（1）供试品溶液的制备；（2）胆固醇成分含量测定：利用高效液相色谱技术测定胆固醇成分含量，对10批供试品溶液进行高效液相色谱测定，得到胆固醇色谱峰的峰面积，根据标准曲线计算供试品中胆固醇的含量，并结合供试品的质量，经计算得到胆固醇的含量为4.33%~7.69%。该方法可以对蛋黄油的质量进行评价，为开发以蛋黄来源的精制胆固醇提供原料的质量分析方法，也为探索开发低胆固醇的蛋黄油提供质量分析方法。该质量检测方法准确、快捷、方便、有效。

主权项

一种蛋黄油中胆固醇的含量测定方法，其特征在于包括如下步骤：（1）供试品溶液的制备：以蛋黄油为原料，取蛋黄油0.25g，置25ml量瓶中，加三氯甲烷‑甲醇（体积比2：1）溶解并稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液；（2）胆固醇成分含量测定：高效液相色谱实验条件如下：C₁₈色谱柱：150mm×3.9mm，5μm；柱温：38℃；流动相系统Ⅰ：以甲醇为流动相A，以甲醇‑异丙醇‑正已烷(体积比10:70:20)为流动相B；洗脱梯度：0‑15 min：100% A；15‑17 min：100%‑40% A；17‑27 min：40% A；27‑32 min：40%‑100% A；32‑42 min：100% A；洗脱时间：42 min；流动相系统Ⅱ：以甲醇为流动相A，以甲醇‑二氯甲烷 (体积比50：50)为流动相B；洗脱梯度：0‑10 min：100% A；10‑20 min：100%‑50% A；20‑25 min：50%‑100% A；25‑30 min：100% A；洗脱时间：30 min；紫外检测器检测波长：205 nm；流速：0.8‑1.2 ml/min; 柱温：36‑40℃；样品进样量：10 μl；胆固醇成分含量测定方法如下：取胆固醇对照品，制成每 1 ml分别含0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg的对照品溶液；高效液相色谱测定：不同浓度的对照品溶液分别以10μl进样，测得各标准品溶液的高效液相色谱峰面积；以所得各标准对照品峰面积为纵坐标，各对应标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线，分别计算得线性回归方程；然后对10批供试品溶液进行高效液相色谱测定，得到胆固醇色谱峰的峰面积，根据标准曲线计算供试品中胆固醇的含量，并结合供试品的质量，经计算得到胆固醇的含量为4.33%~7.69%。