[发明专利]电泳沉积法制备壳聚糖/透明质酸层层复合膜

摘要

本发明涉及利用电泳沉积法制备壳聚糖/透明质酸多层复合膜及最外层分别为壳聚糖膜和透明质酸膜时对L929细胞生长增殖的影响。利用壳聚糖和透明质酸对pH敏感的特性，将处理好的钛电极交替放入壳聚糖和透明质酸溶液中，在一定电场强度下，得到壳聚糖/透明质酸层层复合膜。对得到的层层复合膜进行L929细胞增殖生长实验，结果表明复合膜的最外层不同时，细胞的生长状况是不同的，最外层为透明质酸比最外层为壳聚糖时细胞具有更好的生长增殖状况，这在组织工程支架领域具有一定的应用价值。本发明制备层层复合膜不需使用交联剂，操作过程简单，成本低廉，并且可以通过本发明大批量、连续制备壳聚糖/透明质酸层层复合膜。

主权项

本发明是以壳聚糖和透明质酸钠为原料，基于中和反应机理，用电泳沉积的方法制备了壳聚糖/透明质酸层层复合膜，修饰金属钛电极，并研究了不同层数的复合膜对L929细胞增殖生长的影响，该制备方法包括以下步骤：（1）钛电极的处理：将长3cm,宽2cm，厚0.5cm的钛片用不同目数的砂纸摩擦；将钛片放入水/硝酸/氢氟酸混合溶液中，进行化学抛光2分钟，这三种物质的体积比为5:4:1；依次用丙酮，乙醇，水进行超声清洗处理过的钛片10分钟；（2）壳聚糖电解液的配制：将壳聚糖溶解在超纯水水中，配成一定重量百分比的溶液，然后将溶液充分搅拌，以致完全溶解，即得到壳聚糖电解液；（3）透明质酸钠电解液的配制：将透明质酸钠溶解在超纯水中，配成一定重量百分比的溶液，然后将溶液充分搅拌，以致完全溶解，即得到透明质酸钠电解液；（4）钛电极表面沉积壳聚糖膜：取一片（1）中处理的钛片，一片铂片，通过导线连在一台单路稳压稳流电源上，钛片为阴极，铂片为阳极；取一定量的步骤（2）中配制的壳聚糖电解液，加入到电解槽中，把上面两个电极插入到电解槽中，电极相隔一定距离；接通电源，控制稳压稳流电源的电压，在一定的电压下进行电泳沉积；一段时间后，取出钛电极，在烘箱中干燥，得到钛电极表面沉积壳聚糖膜；（5）钛电极表面沉积壳聚糖/透明质酸两层膜：把（4）中制备的表面沉积有壳聚糖膜的钛片作为阳极，铂片作为阴极，通过导线连在单路稳压稳流电源上；取一定量的步骤（3）中配制的透明质酸钠电解液，加入到电解槽中，把上面两个电极插入到电解槽中，电极相隔一定距离；接通电源，控制稳压稳流电源的电压，在一定的电压下进行电泳沉积；一段时间后，取出钛电极，在烘箱中干燥，得到钛电极表面沉积壳聚糖/透明质酸两层膜；（6）钛电极表面沉积壳聚糖/透明质酸多层复合膜：把（5）中制备的表面沉积有壳聚糖/透明质酸两层膜的钛片作为阴极，铂片作为阳极，通过导线连在单路稳压稳流电源上；取一定量的步骤（2）中配制的壳聚糖电解液，加入到电解槽中，把上面两个电极插入到电解槽中，电极相隔一定距离；接通电源，控制稳压稳流电源的电压，在一定的电压下进行电泳沉积；一段时间后，取出钛电极，在烘箱中干燥，得到钛电极表面沉积壳聚糖/透明质酸/壳聚糖三层膜；再依次重复步骤（5）、（4），可以得到钛电极表面沉积壳聚糖/透明质酸多层复合膜；（7）细胞生长测试：在最外层分别为透明质酸和壳聚糖的钛电极表面沉积壳聚糖/透明质酸多层复合膜表面进行细胞培养测试，随着时间的变化，复合膜表面细胞的生长情况可由扫描电镜测试得到。