[发明专利]一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法

摘要

一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法，用鱼鳞作原料，经过预处理、干燥、脱脂、脱灰、辐照处理、酶解、提取、纯化等步骤提取。由于对鱼鳞原料进行电子束辐照处理后用胃蛋白酶结合柠檬酸进行酶解、提取和纯化，可以缩短酶解时间，提高水解度，提高生产效率，具有提取率高，相对分子量小，纯度高，制造成本低，无二次污染的优点。

主权项

一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法，其步骤如下：①采用优质鱼鳞作原料，加入0.1mol/L的NaOH浸泡24h，蒸馏水洗至中性，再加入0.6mol/L HCL浸泡24h，蒸馏水洗至中性，去掉鱼鳞表面的粘稠物及其它杂质至无明显悬浮杂质；②干燥，将鱼鳞自然晒干，直至水量小于15％，晒干后去掉杂质及不清洁的鱼鳞，贮存备用；③脱脂，将上述鱼鳞放入塑料容器中，用水浸泡，加入5％‑20％鱼鳞重量的氢氧化钠搅拌，除去鱼鳞中的脂质物质，过滤冲洗，加蒸馏水调制至中性；④脱灰，将上述鱼鳞加入容器中，加水浸泡，而后加入5％‑20％鱼鳞重量的10％的柠檬酸，搅拌，直至无泡沫产生为止，脱去鱼鳞中的灰分，用蒸馏水冲洗至中性；⑤辐照处理，采用电子束进行辐照处理，称取一定量经过上述处理过的鱼鳞，置入袋中，厚度控制一致，封口后进行辐照，辐照剂量为5‑300kGy，辐照时间0.5‑5min；⑥酶解，将上述电子束辐照后的鱼鳞加入5‑10倍于鱼鳞重量的水，1％的柠檬酸调节PH至2‑3，然后加入鱼鳞重量的1％‑5％的胃蛋白酶，在5‑12℃下连续搅拌1.5‑5小时，酶解结束后升温至80℃以上，保持20分钟左右进行灭酶；⑦提取，将上述酶解液进行过滤，保存过滤后的溶液，重复过滤两次，将过滤后的溶液以4500r/min离心20min，倾出上清液，3次上清液合并，加入其重量的5％‑15％的氯化钠盐析，4500r/min离心20min，沉淀用其重量的5％‑20％的乙酸溶解，重复盐析和溶解操作一次得到蛋白液；⑧纯化，将蛋白液移入透析袋，用蒸馏水透析3d，每天更换透析水2～3次得到纯化的胶原蛋白溶液，冷冻干燥后备用。