[发明专利]一种检测EGFR基因外显子21L858R点突变的试剂盒和方法

摘要

本发明涉及分子生物学领域，具体为一种检测人表皮生长因子受体基因EGFR外显子21上L858R点突变的方法及试剂盒；以数字PCR为平台，在反应体系中加入PCR引物和TaqMan探针，利用两条标记不同类型荧光的TaqMan探针对野生和突变DNA模板进行检测；根据荧光类型判断样品中DNA模板的类型及其数量及比例。

主权项

一种检测EGFR基因外显子21L858R点突变的PCR引物，其特征在于，为反向引物和正向引物；正向引物含有以下核苷酸序列之一：F1:5’‑AAAACACCGCAGCATGTCAA‑3’，F2:5’‑AACACCGCAGCATGTCAAGA‑3’，F3:5’‑CACCGCAGCATGTCAAGATC‑3’，F4:5’‑CCGCAGCATGTCAAGATCAC‑3’，F5:5’‑GCAGCATGTCAAGATCACAG‑3’；反向引物含有以下核苷酸序列之一：R1:5’‑CTTCTGCATGGTATTCTTTCTCTTC‑3’，R2:5’‑TCCTTCTGCATGGTATTCTTTCTCT‑3’，R3:5’‑CCTCCTTCTGCATGGTATTCTTTCT‑3’，R4:5’‑TGCCTCCTTCTGCATGGTATTCTTT‑3’，R5:5’‑TTTGCCTCCTTCTGCATGGTATTCT‑3’。