[发明专利]扩增植物组织中内生真菌ITS基因的方法及所用引物

摘要

本发明公开了用于扩增植物组织中内生真菌ITS基因的引物，该引物包括巢式PCR第一轮扩增引物对（正向引物NSA3，反向引物NLC2）和巢式PCR第二轮扩增引物对。本发明还同时提供了利用上述引物进行的扩增植物组织中内生真菌ITS基因的方法，包括植物组织基因组的提取，将提取所得的模板DNA进行PCR扩增，包括巢式PCR第一轮扩增和巢式PCR第二轮扩增。采用该方法可以高质量获得植物组织中真菌的ITS基因片段，为准确解析植物内生真菌生物多样性打下基础。

主权项

用于扩增植物组织中内生真菌ITS基因的引物，其特征是：所述引物包括巢式PCR第一轮扩增引物对和巢式PCR第二轮扩增引物对；所述巢式PCR第一轮扩增引物对为：正向引物NSA3：5′‑AAACTCTGTCGTGCTGGGGATA‑3′，反向引物NLC2：5′‑GAGCTGCATTCCCAAACAACTC‑3′；所述巢式PCR第二轮扩增引物对为以下任一引物对：①、正向引物ITS1‑F：5′‑CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA‑3′，反向引物ITS2：5′‑GCTGCGTTCTTCATCGATGC‑3′；②、正向引物ITS1‑F_KYO2：5′‑TAGAGGAAGTAAAAGTCGTAA‑3′，反向引物ITS2_KYO2：5′‑TTYRCTRCGTTCTTCATC‑3′；③、正向引物fITS7：5′‑GTGARTCATCGAATCTTTG‑3′，反向引物ITS4：5′‑TCCTCCGCTTATTGATATGC‑3′；④、正向引物ITS3_KYO2：5′‑GATGAAGAACGYAGYRAA‑3′，反向引物ITS4：5′‑TCCTCCGCTTATTGATATGC‑3′。