[发明专利]基于多项目混合荧光免疫反应的分光分析法

摘要

一种基于多项目混合荧光免疫反应的分光分析法，是建立一个多项目混合荧光免疫反应体系和反应后分光检测体系，用不同的荧光染料分别制备荧光结合物，混合在固相载体上反应，利用不同的荧光染料具有特定的、不同的激发光波长与发射光波长的性质，在检测时通过将某一荧光染料的激发光波长与其发射光波长对应的信号接收器联动，连续、逐一进行荧光免疫反应后的分光分析，实现对各项目的分别测定。本发明可以将多个检测项目组合在一起，一次完成，可有效地增加检测通量，提高检验效率。

主权项

一种基于多项目混合荧光免疫反应的分光分析法，其特征在于：建立多项目混合荧光免疫反应体系和相应的检测体系，根据荧光染料分别具有特定的激发光波长与发射光波长的性质，在检测体系中通过将某一荧光染料激发光波长与与其相应的发射光波长对应的信号接收器联动，逐一、连续进行分析，从而实现分别检测；所述多项目混合荧光免疫反应体系的建立包括以下步骤：(1)确定项目组合数N，选定N+1种激发光波长不同的荧光染料，其中一种荧光染料固定用于试剂内参照；(2)根据项目组合，选择相应的配对抗体，即捕获抗体和标记抗体；并在(1)所述选定的荧光染料的范围内选择荧光染料，取标记抗体分别制备荧光结合物，混合成混合荧光结合物；(3)将针对不同被检测物的多项目捕获抗体混合、混匀后，包被于固相载体上；(4)另选一对抗原抗体作为内参照物，将抗原用步骤(1)所述用于试剂内参照的荧光染料，制备荧光结合物，加入步骤(2)所述混合荧光结合物中，其抗体与步骤(3)所述捕获抗体混合后包被于步骤(3)所述固相载体上；(5)将待检样本与上述包含内参照物的混合荧光结合物先后或同时滴加在上述固相载体上进行荧光免疫反应，反应结束后去除游离荧光结合物，即为待检的反应区；所述检测体系的建立包括以下步骤：(a)根据步骤(1)选定的N+1种荧光染料的激发光波长，确定激发光源；(b)根据步骤(1)选定的N+1种荧光染料的发射光波长定制固定波长分光检测器，在分光光路上与各荧光染料相应的发射光波长处分别设置信号接收器，组成信号接收器阵列，用于分别接收各选定的荧光染料的发射光信号；将上述步骤(5)所述反应区置于激发光的照射区域，用激发光源照射，将发射光聚焦，直接或经分光检测器检测，所得发射光信号经模/数转换、计算机软件处理，最终给出检测结果。