[发明专利]一种临床应用级胎盘造血干细胞的制备方法及保存方法无效
申请号: | 201410052577.7 | 申请日: | 2014-02-17 |
公开(公告)号: | CN103789262A | 公开(公告)日: | 2014-05-14 |
发明(设计)人: | 陈正琳;夏佳音;陈平 | 申请(专利权)人: | 宁波普莱森特生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0789 | 分类号: | C12N5/0789;A01N1/02 |
代理公司: | 宁波市鄞州甬致专利代理事务所(普通合伙) 33228 | 代理人: | 沈亚芳 |
地址: | 315040 浙江省宁*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供一种临床应用级胎盘造血干细胞的制备方法:对新鲜娩出胎盘立即进行预处理,然后分离出脐动脉和脐静脉;用清洗液灌注胎盘绒毛血管,收集灌注后的清洗液;用酶消化液灌注胎盘绒毛血管,置37℃温度下消化5~20min;用收集液灌注胎盘,收集灌注后的液体;将得到的液体离心,弃上清后重悬细胞;重悬的细胞悬液经羟乙基淀粉和淋巴细胞分离液两步法分离,得到本发明临床应用级胎盘造血干细胞。该方法不仅能够提高所制备的胎盘造血干细胞的数量、活力以及CD34阳性细胞的含量,而且是临床应用级的,无潜在病原体污染,另外,该方法制备成本低。 | ||
搜索关键词: | 一种 临床 应用 胎盘 造血 干细胞 制备 方法 保存 | ||
【主权项】:
一种临床应用级胎盘造血干细胞的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)对新鲜娩出胎盘立即进行预处理,然后分离出脐动脉和脐静脉;(2)用清洗液灌注胎盘绒毛血管,收集灌注后的清洗液;(3)用酶消化液灌注胎盘绒毛血管,置37℃温度下消化5~20min;(4)用收集液灌注胎盘,收集灌注后的液体;(5)将步骤(2)、(4)得到的液体离心,弃上清后重悬细胞;(6)重悬的细胞悬液经羟乙基淀粉和淋巴细胞分离液两步法分离,得到本发明临床应用级胎盘造血干细胞。
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