[发明专利]一种从法夫酵母中分离纯化虾青素的方法

摘要

本发明公开了一种从法夫酵母中分离纯化虾青素的方法，包括法夫酵母菌体破壁、丙酮粗提虾青素、脱脂去除低极性类胡萝卜素、去除二甲基亚砜及结晶等步骤，通过有机试剂的高效提取及简单分离纯化步骤相结合，实现了快速分离虾青素的目的，所制得的虾青素纯度高，杂质少，避免了使用常规的柱层析步骤，可以有效保持虾青素的活性官能团，以在分离纯化步骤中，维持虾青素产品质量的稳定。

主权项

一种从法夫酵母中分离纯化虾青素的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、法夫酵母菌体破壁：采用二甲基亚砜对法夫酵母菌体破壁，破壁条件为：菌体与二甲基亚砜按质量体积比，即g/ml，比例为1/2，在55℃温度下，破壁5min；步骤二、丙酮粗提虾青素：破壁后用丙酮按料液比1:15提取，所述料液比为法夫酵母菌体与丙酮的质量体积比，即g/ml，提取2次，合并提取液，低温旋转蒸发去除丙酮，残留的组分为二甲基亚砜溶解的虾青素粗提物，残留组分即为虾青素一次粗提液；步骤三、脱脂及去除低极性类胡萝卜素：用石油醚萃取虾青素一次粗提液，萃取比例为虾青素一次粗提液：石油醚体积比1:2，萃取次数为2次，弃去上层石油醚，收集下层溶液，下层溶液即为虾青素二次粗提液；步骤四、去除二甲基亚砜：虾青素二次粗提液与预冷到4℃的饱和氯化钠水溶液按体积比1:3.5混合，混合液用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯的用量为虾青素二次粗提液的3倍体积；收集乙酸乙酯相，低温旋转蒸发至干，制得纯度较高的虾青素粉末；步骤五、结晶：将步骤四制得的虾青素粉末，加入二氯甲烷溶解，以溶解完虾青素粉末为止，再往溶液中加入甲醇至有结晶析出为止，静置，二氯甲烷自然挥发，使得虾青素晶体析出；在4℃、9961×g离心条件下，离心10min，收集底部结晶即为虾青素。