[发明专利]一种研究高压氧对脑出血大鼠脑内血管新生影响的方法

摘要

一种研究高压氧对脑出血大鼠脑内血管新生影响的方法，将SD大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组（B组）和高压氧组（C组）。采用组织切片HE染色显微镜下观察各组大鼠血肿周围脑组织新生血管形成情况；采用免疫组织化学分析方法检测各组大鼠脑内HIF1-α、VEGF的蛋白表达含量；采用荧光定量RT-PCR方法测定各组大鼠脑组织HIF1-αmRNA、VEGFmRNA的表达水平。

主权项

一种研究高压氧对脑出血大鼠脑内血管新生影响的方法，包括以下步骤：1）10﹪水合氯醛经腹腔麻醉大鼠后，将大鼠固定在鼠脑立体定位仪上，按无菌操作原则，局部消毒进行造模；2）高压氧处理：将高压氧组大鼠在模型制作3小时后置于动物舱内，关紧舱门，以5～8L/min氧流量均匀变速加压，加压时间为15min，当舱内压力达到0.20MPa时开始稳压，稳压时氧浓度85％以上，稳压60min后匀速减压，减压时间为15min，总治疗时间为90min，脑出血组和假手术组大鼠也置于动物舱内90min，不加压，吸空气，三组大鼠均1次/d，连续4d、7d、14d、21d、28d；3）将脑组织置于冰盘上DEPC水处理的培养皿上，分离右侧脑组织，取以苍白球（血肿）为中心的基底节部分脑髓质约100mg置于冻存管中，浸入液氮后，转移至‑80℃保存备用，HE染色：切片脱蜡至水，梯度酒精脱水，苏木精液染胞核3min，1%盐酸酒精分化30s，1%氨水反蓝30s，1%伊红复染胞浆1.5min，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，显微镜下观察血肿周围脑组织新生血管形成情况，进行免疫组织化学分析和免疫荧光定量RT‑PCR。