[发明专利]一种从兔耳软骨中制备高纯度硫酸软骨素A的方法有效

专利信息
申请号: 201410060799.3 申请日: 2014-02-24
公开(公告)号: CN103788231A 公开(公告)日: 2014-05-14
发明(设计)人: 于广利;张玉倩;祝贺;郎银芝;赵小亮 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: C08B37/08 分类号: C08B37/08
代理公司: 沈阳优普达知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 21234 代理人: 张志伟
地址: 266100 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明涉及利用动物器官制备高纯度硫酸软骨素的技术,尤其是一种利用兔耳软骨制备高纯度硫酸软骨素A的方法。将兔耳剥皮、去肉,得新鲜兔耳软骨,经脱脂、胰蛋白酶酶解、乙醇沉淀及阴离子交换树脂纯化,获得高纯度的硫酸软骨素A,其分子量在16~59kDa之间。本发明利用兔耳软骨制备硫酸软骨素A,具有原料来源丰富、产品产率高和纯度高的特点,能满足医药市场对高纯度硫酸软骨素A的需求。
搜索关键词: 一种 软骨 制备 纯度 硫酸 软骨素 方法
【主权项】:
一种从兔耳软骨中制备高纯度硫酸软骨素A的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)脱脂:将新鲜兔耳剥皮、去肉后得兔耳软骨,有机溶剂浸泡,取出软骨干燥后粉碎,得脱脂软骨粉;(2)酶解:脱脂软骨粉用Tris‑HCl缓冲液浸泡,煮沸后降温至37℃,加入胰蛋白酶,37℃恒温搅拌酶解后煮沸使酶灭活;(3)乙醇沉淀:将(2)所得酶解液离心,上清液加入乙醇沉淀,离心后取沉淀加蒸馏水复溶后对蒸馏水透析,透析内液减压浓缩干燥后得软骨素粗提产物;(4)纯化:将(3)所得软骨素粗提产物用蒸馏水溶解,以蒸馏水和不同浓度氯化钠水溶液为流动相,经过Q‑Sepharose Fast Flow强阴离子交换树脂分离纯化,硫酸苯酚法检测,合并收集含有硫酸软骨素A组分,对蒸馏水透析,减压浓缩、冻干,得到硫酸软骨素A。
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