[发明专利]重组阿达木单抗Fab片段在大肠杆菌中的制备方法在审
| 申请号： | 201410066863.9 | 申请日： | 2014-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN104862328A | 公开（公告）日： | 2015-08-26 |
| 发明（设计）人： | 吕立力;范丽君;汪俊;陈春麟 | 申请（专利权）人： | 上海美迪西生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K16/24;C07K1/16 |
| 代理公司： | 上海瀚桥专利代理事务所(普通合伙) 31261 | 代理人： | 曹芳玲;郑优丽 |
| 地址： | 201299 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种重组阿达木单抗Fab片段在大肠杆菌中的制备方法，包括：将由N端分别带有信号肽的Fab片段的重链Fd与轻链的氨基酸序列反转化的基因克隆于带有双启动子的大肠杆菌表达载体内构建重组表达载体；将所得的重组表达载体转化至作为宿主细胞的大肠杆菌获得重组菌，培养所述重组菌并在培养基中加入诱导剂诱导双基因共分泌表达获得经诱导表达的菌体；通过渗透压冲击法提取经诱导表达的菌体的周质蛋白；对所得的周质蛋白进行色谱柱纯化，即可得到阿达木单抗的Fab片段。本发明可制得较高纯度的Fab片段，且能与抗原TNF-α特异性结合，其抑制效果与全抗分子相比无明显的差异，说明该Fab片段保留了原adalimumab抗体具备的抗体性质和特异性。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 阿达木单抗 fab 片段 大肠杆菌 中的 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组阿达木单抗Fab片段在大肠杆菌中的制备方法，其特征在于，包括：（a）将由N端分别带有信号肽的Fab片段的重链Fd与轻链的氨基酸序列反转化的基因克隆于带有双启动子的大肠杆菌表达载体内构建重组表达载体；（b）将所得的重组表达载体转化至作为宿主细胞的大肠杆菌获得重组菌，培养所述重组菌并在培养基中加入诱导剂诱导双基因共分泌表达获得经诱导表达的菌体；（c）通过渗透压冲击法提取经诱导表达的菌体的周质蛋白； （d）对所得的周质蛋白进行色谱柱纯化，即可得到阿达木单抗的Fab片段。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海美迪西生物医药有限公司，未经上海美迪西生物医药有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410066863.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
