[发明专利]一种无菌蚕虫草的培育方法

摘要

本发明涉及一种无菌蚕虫草的培育方法，步骤如下：（1）将蚕卵经消毒后，在无菌条件下孵育，制得无菌蚕体；（2）将蛹虫草子实体在无菌环境下培养，制得接种菌液；（3）采用无菌注射方式将接种菌液接种于无菌蚕体的尾角、腹足或节间，正常无菌饲养2～3天，将僵化的蚕体除沙后，在黑暗条件下培养，然后感光出草培养，经低温烘干，制得无菌蚕虫草。本发明通过在无菌环境下人工饲育的无菌蚕幼虫栽培北虫草，排除了蚕体本身体内的多种微生物对北虫草生长的影响，较普通桑叶育家蚕幼虫的接种僵化率、出草率高，并且培养出的蚕虫草有效成分更高。

主权项

一种无菌蚕虫草的培育方法，其特征在于，步骤如下：（1）将蚕卵经消毒后，在无菌条件下孵育至5龄第1～2天，制得无菌蚕体；（2）将蛹虫草子实体置于消毒液中消毒2～3min，无菌水洗净，取中间部位组织块切片，将组织片接种于固体培养基中，18℃～25℃黑暗培养7～10天；然后感光培养2～4天，将菌丝接种于液体菌种培养基中，黑暗条件下，每天在恒温摇床上以200r/min摇1～3小时，继续培养3～7天后得到液体菌种，制得接种菌液；（3）采用无菌注射方式将步骤（2）制得的接种菌液接种于步骤（1）制得的无菌蚕体的尾角、腹足或节间，每条无菌蚕体的接种量为0.09～0.11mL，经16～20℃无菌晾干45～80min，正常无菌饲养2～3天，将僵化的蚕体除沙后，在黑暗条件下，保持湿度80%～90%，温度18～25℃，培养6～8天，然后感光出草培养25～35天，经100℃以下的低温烘干1～3h，制得无菌蚕虫草。