[发明专利]一种规模化构建雌雄异体型双壳贝类自交系的新方法

摘要

本发明公开了一种规模化构建雌雄异体型双壳贝类自交系的新方法。本发明通过单体精子获取，超低温精子冷冻，利用贝类时间上性逆转特性，收集雄性转化为雌性个体的卵子，之后激活冷冻精子与同一个个体卵子受精、孵化，获得了来自于同一个个体子代，即成功构建了自交系。本发明不同于传统上筛选空间上雌雄异体型贝类中雌雄同体个体构建自交系的习惯，实现了多种雌雄异体型贝类自交系规模化构建，加快雌雄异体型贝类基因纯化速度，缩短品种培育周期，为纯系（新品种）构建奠定了坚实基础。本发明无异源基因倒入、具有操作简便、实用性强、易于推广等优点。

主权项

一种规模化构建雌雄异体型双壳贝类自交系的新方法，其特征在于，包括以下步骤：a、获取精子：雌雄异体型双壳贝类的亲贝性成熟时，采用阴干、流水刺激使其排放配子，当其开始排放配子时，抓取单体雄性个体，利用淡水冲洗干净后，单个放置一个盛满新鲜海水的容器中，使其继续排放精子，获得单个个体的精子；b、冷藏精子：将获取的单个个体精子经过沉淀、浓缩，利用超低温冷冻保存技术冷藏贝类精子；同时，将每一个雄性个体编号，选择该物种环境适宜的条件继续饲养下去；c、收集卵子：翌年繁殖季节时，有一定比例的雄性个体会转为雌性，发生时间性逆转现象，因此当b步骤继续饲养的个体性成熟时，采用阴干、流水刺激使其排放配子，当其排放配子时，挑出雌性个体，淡水冲洗干净，之后放置于盛满新鲜海水的容器中，收集单体卵子或对于能剖取卵的种类，可直接解剖获取单体卵子；d、受精孵化：活化b步骤中冷冻精子，然后再与c步骤中对应的同一个个体的卵子受精，实现同一个个体精卵受精结合，成功建立了自交系。