[发明专利]一种可去除随机整合的位点特异性整合载体及其构建方法和应用有效
申请号: | 201410073055.5 | 申请日: | 2014-02-28 |
公开(公告)号: | CN103820494A | 公开(公告)日: | 2014-05-28 |
发明(设计)人: | 张涌;余源;李仲夏;佟琪;王易之;王勇胜;刘军;权富生;郭泽坤 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学;杨凌科元克隆股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/66 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 蔡和平 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种可去除随机整合的位点特异性整合载体及其构建方法和应用,包括pUC ori、attB序列和多克隆位点MCS,在attB序列上下游分别设有第一loxP序列和第一rox序列,CMV启动子连接在第一loxP序列的上游,负筛选基因与第一rox序列相连接,负筛选基因下游还连接有内核糖体结合位点IRES2,IRES2下游为荧光标记基因,荧光标记基因下游为MCS,MCS上下游分别设有第二rox序列和第二loxP序列,并且分别与第一rox序列和第一loxP序列方向相同,MCS下游为正筛选元件。本发明为在细胞筛选中提供剔除随机整合重组细胞而直接筛选出假attP位点特异整合的重组细胞的新的应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 去除 随机 整合 特异性 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种可去除随机整合的位点特异性整合载体,其特征在于,包括pUC ori、attB序列和多克隆位点MCS,在attB序列上下游分别设有第一loxP序列和第一rox序列,CMV启动子连接在第一loxP序列的上游,负筛选基因与第一rox序列相连接,负筛选基因下游还连接有内核糖体结合位点IRES2,IRES2下游为荧光标记基因,荧光标记基因下游为MCS,MCS上下游分别设有第二rox序列和第二loxP序列,并且分别与第一rox序列和第一loxP序列方向相同,MCS下游为正筛选元件。
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