[发明专利]白芷花药诱导成苗培养方法

摘要

本发明涉及一种植物的花药培养方法，尤其是涉及白芷花药诱导成苗培养方法，属于植物组织培养技术领域。白芷花药诱导成苗培养方法包括花药的采集、温度预处理、消毒灭菌、接种、壮苗、生根培养、炼苗移栽七个步骤。本发明通过花药培养技术诱导白芷花药形成单倍体苗，诱导愈伤率高，一步成苗。相对已有的白芷花药培养方法而言，接种40-60天可直接出苗，在诱导愈伤组织的同时无需再添加任何重金属、其他添加剂或改变植物生长激素即可成苗，通过壮苗生根可发挥快繁的优势，短时期内获得大量花药培养植株；具有诱发时间短、出苗快、苗产量高、苗健壮易成活的优点。

主权项

白芷花药诱导成苗培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)花药采集白芷开花初期，采集花粉生长在单核靠边期的白芷花序；(2)温度预处理采集到的白芷花序，进行温度预处理；(3)消毒灭菌取温度预处理过的白芷花序流水冲洗30‑40min，在超净工作台上用75％酒精处理30s后再用0.1％升汞浸泡10‑15min，倒掉升汞溶液，用无菌水漂洗5次，每次4‑5min，用无菌干燥滤纸吸干花序表面水分备用；(4)诱导愈伤及成苗在超净工作台上，以无菌挑针从灭过菌的白芷花序中挑取花药接种到愈伤组织诱导培养基上，暗培养到愈伤组织形成，接着光培养至分化开始形成丛生芽；(5)壮苗将上一步所得的白芷丛生芽、带芽点的愈伤组织在无菌条件下转接到壮苗培养基上进行培养成独立的健壮植株；(6)生根培养将上一步所得无菌苗转移到生根培养基中进行生根培养，直至形成完整植株；(7)炼苗与移栽将上述获得完整植株的无菌瓶，室温条件下打开瓶盖添加30‑50ml无菌水，每天喷施稀释2000倍的MS微量元素4‑5次，5‑6天后将苗取出，洗净根部培养基即刻移栽到浇透水的营养土中，1200LX光照，25+1℃光照培养箱中炼苗，每天继续喷施稀释2000倍MS微量元素3‑4次，足月后移栽到大田。