[发明专利]一种基于光纤倏逝波生物传感器检测大肠杆菌O157：H7的方法

摘要

本发明公开了一种基于光纤倏逝波生物传感器检测大肠杆菌O157：H7的方法，它是用CdTe量子点与大肠杆菌O157:H7多克隆抗体的偶联，大肠杆菌O157:H7单克隆抗体包被光纤，光纤探针插入含有待测菌的溶液中，使抗原与捕获抗体发生的特异反应从而将抗原固定于光纤上，然后再将该光纤探针插入发含有检测抗体的溶液中，使检测抗体上的纳米量子点也结合到光纤表面，再利用光纤倏逝波生物传感器对大肠杆菌O157:H7进行检测，该对提高食品中病原微生物的检出率具有重要应用价值，对于促进人类健康和我国的经济发展具有重要意义。

主权项

一种基于光纤倏逝波生物传感器检测大肠杆菌O157：H7的方法，它包括：1）CdTe量子点与大肠杆菌O157:H7多克隆抗体的偶联取水溶性CdTe量子点与PBS缓冲液混合，大肠杆菌O157:H7多克隆抗体加入到上述混合液中，然后将加入新制备的EDC溶液，将混合样品在37℃培养箱中避光反应2个小时，然后4℃过夜，将反应混合液离心，上清液用超滤膜反复进行超滤，去除小分子物质和未反应的CdTe量子点，收集超滤膜截留的 CdTe‑多克隆抗体偶联物；2）捕获抗体光纤探针的制备将聚苯乙烯光纤表面，先用盐酸和乙醇混合液清洗，再用硫酸清洗，接下来在超纯水中煮沸，使光纤表面具有亲水的极化层；然后将处理好的光纤放入1 大肠杆菌O157单抗的溶液中浸泡，取出用去离子水洗净，即得到包被有捕获抗体光纤探针；3）大肠杆菌O157:H7的检测将CdTe‑多克隆抗体偶联物制成水溶液，将捕获抗体光纤探针插入待测溶液中，然后再将捕获抗体光纤探针放入CdTe‑多克隆抗体偶联物制成的水溶液中，用光纤倏逝波生物传感器检测。