[发明专利]一种用于分析促胆固醇流出能力的体外检测方法及其应用

摘要

本发明公开了一种用于分析促胆固醇流出能力的体外检测方法，该方法选用人THP-1巨噬细胞株等为基础，用特定细胞膜转运体抑制剂和／或RNA干扰技术沉默相关膜胆固醇转运蛋白基因的表达，加入荧光标记的胆固醇和细胞孵育，然后将细胞株接种于培养板孔中，加入待测样品，共同在37℃孵育，采用微孔板读板机检测培养液中胆固醇的浓度，计算细胞胆固醇流出率。本发明提供的方法，可快速有效地评估待测样品促胆固醇流出能力以及和各特定胆固醇转运体功能间的关系，可采用自动化检测仪器的高通量检测，检测效率更高，检测结果更准确，可用于动脉粥样硬化等心血管系统疾病风险的评估以及新药筛选，应用范围广泛。

主权项

一种用于分析促胆固醇流出能力的体外检测方法，其特征在于，包括以下步骤：首先选用人体细胞株为基础，然后用特定细胞膜转运体抑制剂和／或RNA干扰技术沉默相关膜胆固醇转运蛋白基因的表达，然后将细胞株接种于培养板孔中，然后加入含荧光标记胆固醇的培养液和细胞孵育1小时，使细胞荷脂和标记；然后将待测样品加入以上细胞培养板孔中，共同在37^oC孵育1到12小时，然后吸取培养板孔中的上清培养液，用微孔板读板机检测培养液中荧光强度以计算胆固醇的浓度和待测样品促进细胞的胆固醇流出率。