[发明专利]一种利用蛋白支架提高大肠杆菌中异戊二烯合成的方法有效
申请号: | 201410088310.3 | 申请日: | 2014-03-11 |
公开(公告)号: | CN103898149A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 李春;屈虹男;李哲;王翠薇 | 申请(专利权)人: | 北京理工大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C12P5/02;C12R1/125;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种利用蛋白支架将大肠杆菌MEP途径中的脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶、脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶和2-甲基赤藓糖醇-4-焦磷酸合成酶共区域化,提高异戊二烯生产的方法,属于生物化工领域。本发明从枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中分别克隆了所需靶酶分子的基因,构建成增强MEP代谢途径的重组质粒,合成银白杨异戊二烯合成酶基因并构建外源表达蛋白支架以及异戊二烯合成酶的重组质粒,将两种重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中,获得可以通过蛋白支架将三种靶酶分子共区域化提高异戊二烯合成的大肠杆菌工程菌株。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 蛋白 支架 提高 大肠杆菌 中异戊二烯 合成 方法 | ||
【主权项】:
一种提高大肠杆菌异戊二烯合成的方法,其特征在于:利用支架蛋白将脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶(DXS)、脱氧木酮糖‑5‑磷酸还原异构酶(DXR)及2‑甲基赤藓糖醇‑4‑焦磷酸合成酶(IspD)共区域化,提高异戊二烯前体物质二甲基丙烯基焦磷酸(DMAPP)及异戊二烯焦磷酸(IPP)的积累量,再通过表达植物来源的异戊二烯合成酶(IspS)实现异戊二烯的合成。
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