[发明专利]一种磁性纳米颗粒对核酸的提取方法和应用无效
申请号: | 201410104294.2 | 申请日: | 2014-03-20 |
公开(公告)号: | CN103834637A | 公开(公告)日: | 2014-06-04 |
发明(设计)人: | 陆欣华;代广颖 | 申请(专利权)人: | 陆欣华 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人: | 杨洋;姚姣阳 |
地址: | 200438 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种磁性纳米颗粒对核酸的提取方法。该方法包括:步骤一,使用裂解缓冲液裂解样品,得到样品裂解液;步骤二,将5μL-100μL的磁性纳米颗粒的溶液加入到20μL-100μL所得的样品裂解液中,再加入20μL-500μL的结合缓冲液,混匀,转移入离心管中,置磁力架上10秒-50秒,待磁性纳米颗粒吸附分离核酸后,移除液体,得到吸附了核酸的磁性纳米颗粒;步骤三,向吸附了核酸的磁性纳米颗粒中加入50μL-200μL的洗涤缓冲液,混匀,置磁力架上10秒-50秒,待至少一次的洗涤后,移除液体;步骤四,向洗涤过后的吸附了核酸的磁性纳米颗粒中加入20μL-50μL的洗脱缓冲液,混匀,置磁力架上10秒-50秒,待充分洗脱后收集洗脱液,核酸即在所得洗脱液中。本发明首次实现对miRNA的提取,且提取效率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 磁性 纳米 颗粒 核酸 提取 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种磁性纳米颗粒对核酸的提取方法,包括如下步骤:步骤一,使用裂解缓冲液裂解样品,得到样品裂解液,其中,裂解缓冲液的用量和样品的用量的比例关系为每40μL的裂解缓冲液对应106细胞数量的样品;步骤二,将5μL‑100μL的磁性纳米颗粒的溶液加入到20μL‑100μL所得的样品裂解液中,再加入20μL‑500μL的结合缓冲液,混匀,转移入离心管中,放置在磁力架上磁性分离10秒‑50秒,待磁性纳米颗粒吸附分离核酸后,移除液体,得到吸附了核酸的磁性纳米颗粒;步骤三,向吸附了核酸的磁性纳米颗粒中加入50μL‑200μL的洗涤缓冲液,混匀,放置在磁力架上磁性分离10秒‑50秒,待至少一次的洗涤后,移除液体;步骤四,向洗涤过后的吸附了核酸的磁性纳米颗粒中加入20μL‑50μL的洗脱缓冲液,混匀,放置在磁力架上磁性分离10秒‑50秒,待充分洗脱后收集洗脱液,核酸即在所得洗脱液中。
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