[发明专利]一种解脲脲原体14种血清型荧光定量PCR检测方法无效
申请号: | 201410113941.6 | 申请日: | 2014-03-25 |
公开(公告)号: | CN103966315A | 公开(公告)日: | 2014-08-06 |
发明(设计)人: | 谢鑫友;张钧;宋铁军;黄珺 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 周烽 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种解脲脲原体14种血清型荧光定量PCR检测方法,该方法14种血清型均采用20微升反应体系,其中引物和探针的终浓度均为0.2微摩尔每升(uM),镁离子终浓度染料法为2毫摩尔每升(mM),探针法为3mM,染料法加10微升qPCRMasterMix,探针法加10微升定量PCRSuperMix-UDG。本发明首次实现了用分子生物学方法对解脲脲原体的14种血清型进行分型,解决了传统分型方法灵敏度低、重复性差的缺点,为今后在血清型水平进一步研究解脲脲原体的致病性打下了方法学基础,可广泛应用于临床。 | ||
搜索关键词: | 一种 解脲脲 原体 14 血清 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种解脲脲原体14种血清型荧光定量PCR检测方法,其特征在于,该方法包括:(1)14种血清型均采用20微升反应体系,其中引物和探针的终浓度均为0.2微摩尔每升(uM),镁离子终浓度染料法为2毫摩尔每升(mM),探针法为3mM,染料法加10微升qPCR Master Mix,探针法加10微升定量PCR SuperMix‑UDG;引物和标记探针如下:血清型 引物、探针 序列(5’—3’) (2)荧光定量PCR检测解脲脲原体14种血清型扩增条件:
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