[发明专利]一种铁皮石斛组培繁育方法

摘要

本发明涉及一种铁皮石斛组培繁育方法，属于植物培育技术领域。提供了一种在人工控制条件下，对铁皮石斛种苗进行组培快速繁育，并在大棚内创造一个仿自然环境对铁皮石斛种苗进行驯化炼苗的组培繁育方法，建立了一套铁皮石斛组培繁育与人工丰产栽培标准化生产技术，实现铁皮石斛的快速繁育，从而满足铁皮石斛的市场需求。

主权项

 一种铁皮石斛组培繁育方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）外植体选取：采摘铁皮石斛外植体应避开霉雨季节与酷暑天气，繁育的材料取从尖端往下20厘米的嫩茎；（2）外植体消毒：取品质好、长得壮实的新鲜铁皮石斛，剪嫩端，去掉叶子；再用刀片切成长3‑5厘米的小节，放入加有肥皂水的无菌水里浸泡1小时；然后，剥掉茎杆上的薄皮，上超净工作台，放到升汞里消毒20分钟；最后，用镊子把其从升汞里夹出，放到浓度为70％的酒精里浸泡10分钟；（3）外植体接种：把经过消毒的铁皮石斛外植体反复用无菌水冲洗；再用消毒好的镊子夹铁皮石斛茎部的中部，插放在MS+NAA0.2+BA2的培养基中，每瓶插3‑4根；（4）培养：接种好以后，放入培养室培养，光照时间10‑14小时，光照强度为3000LX，室内温度控制在24℃；（5）增殖培养：铁皮石斛外植体培养14‑16天后出新芽，新芽长到1.5‑2.5厘米时切下；再接到MS+BA5+NAA2的培养基中做增殖培养，从而得到原球茎；利用原球茎大量做增殖培养，得出一代母本苗；（6）生根培养：在MS+NAA（0.2‑0.5）+土豆汁20％+活性炭10％的生根培养基中加入抗污杀菌剂200倍液，明显减少感染率，使感染率控制在﹤5%；（7）炼苗：（7A）选苗：从培养室挑选出苗高3到8厘米、茎粗在0.2厘米以上、肉质茎达3‑4个节间、单株叶片数在5片以上、2厘米长的根达5‑6条的瓶苗，放到大棚瓶内炼苗10天；（7B）洗苗：大棚瓶内炼苗10天后，开盖，用镊子把苗夹出，用清水彻底洗净根系上残留的培养基，除去黄叶片；清洗分为粗洗、细洗与精洗；（7C）消毒：精洗好的苗用多菌灵200倍液浸泡1分钟，捞出晾干备栽；（7D）炼苗基质：选用直径小于10毫米的松树的树皮平铺在苗床上，厚度为10‑15公分，用多菌灵100倍液彻底浇透；（7E）种植：消毒好的苗晾干至根系发白变软即可；种在湿度为45%‑55%的基质上；植株间距为5厘米；铁皮石斛苗不宜深栽，基质盖住根系就好，如果栽深了会影响基部新芽萌发；在栽苗过程中做好大棚的遮阳；刚种的苗一周内不宜浇水；（8）大棚管理：保持棚内温度为18‑28℃，空气湿度为80%；一周后，给新种的苗喷雾浇水；15天后，铁皮石斛苗基部开始萌发新芽，进行追肥；45天后，移栽到大棚基质上；夏天高温天气，大棚天窗全部打开，同时利用棚内喷淋系统降温，并且做好遮阳措施，浇水次数也会增加，夏天一般在早上8点开始浇水10点半结束，晚上还要补水，每周灌根一次；防治青虫与蜗牛，及霜霉病、斑腐病等病害的发生。