[发明专利]一种花叶玉簪快速繁殖的方法

摘要

本发明涉及一种花叶玉簪快速繁殖的方法，主要通过外植体的选择及消毒、继代增殖培养、生根培养以及炼苗移栽的步骤，特别是在继代过程中，提高了光强，培养基中减少了无机盐含量，增加了磷酸二氢钾和水解乳蛋白，同时采用了转换继代培养基的技术手段，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高的优良效果。

主权项

一种花叶玉簪快速繁殖的方法，其特征在于，包括：(1)外植体的选择及消毒：于3‑4月选晴朗天气直接在大田中取块茎上的萌发芽做为外植体，或者在其它月份提前30天左右在地里挖出玉簪洗净后种植在以干净的珍珠岩为基质的盆中，后放在干净温室中只浇清水；用小刀削下块茎上的芽子，后浸于盛有饱和肥皂水的烧杯中5‑10分钟，再用自来水冲洗到基本无泡沫，然后再重复上述浸泡冲洗的步骤一次，浸泡时间缩短至2‑4分钟，自来水冲洗时间不易过长以免造成外植体二次污染，转入超净工作台，在超净台中先用70％的酒精浸泡1分钟，无菌水冲洗2次，用含有两滴吐温80的5％次氯酸钠溶液消毒10‑15分钟，无菌水冲洗5次；再用含有两滴吐温80的0.1％的升汞消毒10‑15分钟，用无菌水冲洗6次；(2)接种培养：取将步骤(1)所述的外植体，首先剥去芽的苞叶，尽量多剥几层，切取带有潜伏芽的外植体接种到接种培养基中，每瓶只接一块，培养基的PH6.2，培养温度为23±1℃，12h/d的光周期，光照强度600Lx左右，培养3‑7天开始生长，所述接种培养基为1/2MS+6‑BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L；(3)继代培养：将不污染的带有新营养芽的外植体转入第一继代培养基中使芽增殖，所述第一继代培养基是1/2MS+6‑BA0.5‑2mg/L+NAA0.1‑0.5mg/L+磷酸二氢钾150mg/L+水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L，继代5次左右，转入第二继代培养基或不添加任何激素的空白培养基中继代一次，所述第二继代培养基为1/2MS+IBA0.8mg/L+磷酸二氢钾150mg/L+水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L，所述空白培养基为1/2MS+磷酸二氢钾150mg/L+水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L，然后再转入第一继代培养基中继续增殖，根据需苗量重复上述步骤；继代培养过程中，培养基的PH6.2，培养温度为23±1℃，14‑18h/d的光周期，光照强度1000Lx左右；(4)生根培养：将继代培养得到的小芽直接转入生根培养基中，较大的苗从中间竖着劈开一分为二再转入生根培养基中，培养基的PH6.2，培养温度为23±1℃，12h/d的光周期，光照强度600Lx左右，所述生根培养基为1/2MS+NAA0.3mg\L+蔗糖20g/L，20天左右生根，当根生长到3cm左右出瓶，根生长过长或生根时间过长都会影响移栽成活；(5)炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4d，然后解开封口膜，炼苗6d，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的基质中，温度控制在24‑26℃，前7d湿度控制在70％左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下，炼苗移栽期间适当遮光，使光照强度为自然光的50％。