[发明专利]帕金森病和脑白质疏松症的突变检测试剂盒及其检测方法

摘要

帕金森病和脑白质疏松症的突变检测试剂盒及其检测方法，属于分子诊断领域。试剂盒设有包装盒、两对引物序列、PCR扩增反应试剂、酶切反应试剂、阳性标准品和阴性标准品。试剂盒在检测金森病和脑白质疏松症相关突变rs2066842，rs75932628中应用。检测方法：使用Primer5.0软件和Oligo7.0软件根据人类CARD15基因和TREM2基因序列获得分别包含rs206684和rs75932628的特异性PCR扩增产物；将特异性PCR扩增产物，分别用限制性内切酶BamHI和HhaI酶切；联合毛细管电泳检测，根据酶切片段的数量和酶切片段大小，检测这两个位点是否发生突变以及突变类型。

主权项

帕金森病和脑白质疏松症的突变检测试剂盒，其特征在于设有包装盒、两对引物序列、PCR扩增反应试剂、酶切反应试剂、阳性标准品和阴性标准品；所述两对引物序列为：rs2066842的正向引物F1：AGCCCATTGTCTGGTTAGGT；rs2066842的反向引物R1：ACAGTGTCCGCATCGTCAT；rs75932628的正向引物F2：ATCATGGGGTTGTAGATTCCG；rs75932628的反向引物R2（CCACAACACCACAGTGTTCCA；所述PCR扩增反应试剂包括脱氧单核苷酸（dNTP）、10×PCR缓冲液、MgCl₂、无菌双蒸水和DNA聚合酶（Taq酶）；所述酶切反应试剂包括限制性内切酶BamHI和限制性内切酶HhaI，100×牛血清蛋白（BSA），10×酶切缓冲液；所述阳性标准品是含有rs2066842和rs2066842双链DNA突变的质粒；所述阴性标准品是连接正常目的DNA序列的质粒。