[发明专利]抗HER2的多克隆抗体及其制备和应用无效
申请号: | 201410139514.5 | 申请日: | 2014-04-09 |
公开(公告)号: | CN103910800A | 公开(公告)日: | 2014-07-09 |
发明(设计)人: | 毕爱国;刘诚;周冬冬 | 申请(专利权)人: | 杭州雅盛生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/28 | 分类号: | C07K16/28;C07K16/02;G01N33/68;G01N33/574 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 高文迪 |
地址: | 310007 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提出了一种抗HER2的多克隆抗体及其制备和应用,其中抗HER2的多克隆抗体在制备用于检测HER2蛋白的免疫检测工具中的应用。所述的抗HER2的多克隆抗体在制备用于诊断HER2过度表达产生的恶性肿瘤的试剂盒中的应用。本发明给HER2蛋白抗原检测提供一种高特异性、高灵敏度的优质的抗体。 | ||
搜索关键词: | her2 克隆 抗体 及其 制备 应用 | ||
【主权项】:
一种抗HER2的多克隆抗体,其特征在于,其制备方法如下:(a)免疫原的制备通过基因克隆和原核表达HER2蛋白,并通过包涵体破碎得到部分可溶蛋白,再经过亲和层析纯化得到HER2蛋白;首次免疫用弗氏完全佐剂,以后的加强免疫用弗氏不完全佐剂;(b)蛋鸡免疫取刚开始产蛋的蛋鸡进行免疫,一共进行4次,每次间隔15天;(c)免疫效果监测免疫后由鸡翅下取血,分离血清进行ELISA血清效价检测,与免疫前鸡血清进行比较,收集免疫后比免疫前血清效价提高6~8倍的鸡蛋;(d)IgY提取与分离分离蛋黄,粗提IgY,超滤浓缩后采用沉淀法沉淀IgY,离心取沉淀,PBS复溶后备用;(e)IgY纯化将经过步骤(d)处理后的IgY采用疏水层析法进行层析纯化,线性梯度洗脱,收集单峰即为IgY抗体,纯度大于98%以上。
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