[发明专利]一种利用单层磷脂膜组装α-溶血素蛋白质纳米孔的方法

摘要

本发明公开了一种利用单层磷脂膜组装形成α-溶血素七聚体生物纳米孔的方法，本发明将重组有野生型αHL基因的pT7质粒转入到BL21(DE3)pLys中，进行IPTG诱导后，用超滤离心管分子截留法纯化单体蛋白，并在DPhPC单层膜上实现αHL单体蛋白的组装，通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳证明了蛋白表达，纯化及组装结果。αHL七聚体生物纳米孔单通道电流记录特征良好。当制备的七聚体纳米孔用于单分子分析时，能够实现无机离子，小分子，DNA，RNA等检测。本发明制备纯化蛋白方法简单、经济、快速，并且可以适用于αHL的各种突变型蛋白，同源以及异源七聚体纳米孔制备。

主权项

一种利用单层磷脂膜组装α‑溶血素蛋白质纳米孔的方法，其特征在于：将αHL单体蛋白溶液浸没在DPhPC/十六烷混合液中，在单体蛋白溶液周围形成单层磷脂膜，αHL单体在单层磷脂膜上形成七聚体αHL蛋白质纳米孔，进一步经分离、纯化得到αHL蛋白质纳米孔。