[发明专利]一种用于检测17β-雌二醇的光电适配体传感器的制备方法

摘要

本发明涉及一种用于检测17β-雌二醇的光电适配体传感器的制备方法，所述光电适配体传感器以制备的硒化镉纳米粒子修饰二氧化钛纳米管作为基体电极，用壳聚糖和戊二醛将电极表面功能化后，将17β-雌二醇适配体滴于电极表面，制备得到17β-雌二醇的光电适配体传感器。与现有技术相比，本发明将具有特异性识别能力17β-雌二醇适配体和超灵敏的光电分析技术结合用于对环境内分泌干扰物17β-雌二醇的检测，不仅能获得了高的灵敏度，而且能抵制复杂基体环境的干扰获得高的选择性，在用于低浓度17β-雌二醇的检测中，获得了宽的工作曲线范围5×10^-13-15×10^-12mol/L，最低检测限可达3.3×10^-14mol/L。且该17β-雌二醇传感器制备方法简单，成本低，稳定性及重现性好。

主权项

一种用于检测17β‑雌二醇的光电适配体传感器的制备方法，其特征在于所述光电适配体传感器以硒化镉纳米粒子（CdSe NPs）修饰二氧化钛纳米管（TiO₂  NTs）为基体电极，在二氧化钛纳米管内外修饰具有专一性识别能力的17β‑雌二醇适配体作为探针，并与光电分析技术结合构筑了一种简单、快速的光电适配体传感器，所述光电适配体传感器可实现高灵敏度和高选择性检测17β‑雌二醇；具体步骤如下： （1）钛板依次用不同细度的磨砂纸机械打磨，接着将其放入二次蒸馏水和乙醇溶液中分别进行超声清洗5～10 min；然后将所得钛板用18%的HCl刻蚀10 min；之后将其放在两电极体系中进行阳极化，铂片作阴极，钛板作阳极，两电极间间距为1 cm, 外加槽电压为40 V，在25℃温度时，阳极化2～3 h；电解液采用0.3 wt% NH₄F和3.0 Vol% H₂O 的乙二醇溶液；阳极化后的TiO₂ NTs 用二次蒸馏水冲洗并在氮气气氛中吹干；之后将其置于管式炉中在氧气气氛下500 ℃烧结，得到晶形化的TiO₂ NTs；（2）将步骤(1)制备得到的TiO₂ NTs放入三电极体系，TiO₂ NTs为工作电极，铂电极为辅助电极，饱和甘汞电极为参比电极，电解液为0.1 mol/L硫酸镉，0.1 mol/L无水硫酸钠和1.0 mmol/L二氧化硒，在‑0.7 V的恒电压下，沉积1～2 h；将CdSe NPs均匀的沉积在TiO₂ NTs的管内外，得到CdSe NPs‑TiO₂ NTs电极，并将CdSe NPs‑TiO₂ NTs电极在氮气气氛中，300 ℃下烧结；（3）将步骤(2)得到的CdSe NPs‑TiO₂ NTs电极留有1cm×1cm大小的电极面积，将1 %乙酸的壳聚糖溶液滴在1 cm² 的CdSe NPs‑TiO₂ NTs电极上，在40 ℃恒温下干燥；之后用0.1 mol/L NaOH 和去离子水冲洗数次，并干燥；然后将5 %的戊二醛溶液滴在CdSe NPs‑TiO₂ NTs电极表面，室温下，反应30 min，用去离子水冲洗并干燥；（4）取末端氨基修饰的17β‑雌二醇适配体，滴于步骤(3)所得附有壳聚糖和戊二醛的NPs‑TiO₂ NTs电极表面，在4 ℃下反应12 ～18 h；并冲洗以去除物理吸附的适配体，然后用牛血清蛋白堵塞未键合的戊二醛活性位点，以避免非特性吸附，得到17β‑雌二醇适配体修饰的CdSe NPs‑TiO₂ NTs的传感器，不用时，将其置于0.1 mol/L PBS（pH 7.41）的缓冲溶液。