[发明专利]一种发酵生产那西肽的方法

摘要

本发明公开了一种发酵生产那西肽的方法，该方法包括斜面孢子的制备、种子罐菌体的培养和发酵罐配方及控制，通过控制发酵罐中pH值的范围及溶氧范围实现了发酵过程的正常进行，并使菌体产素能力提高，从而降低了生产成本，减轻了环保压力，具有重要的经济、社会和环境效益，适于规模化生产应用。

主权项

一种发酵生产那西肽的方法，其特征在于，操作步骤包括：a.斜面孢子的制备：斜面培养基成分为（g/100mL）：可溶性淀粉1.5‑2.0，磷酸氢二钾0.05‑0.08，硫酸镁0.05‑0.10，硫酸亚铁0.001‑0.005，氯化钠0.01‑0.05，硝酸钾0.1‑0.4，琼脂1.5‑2.0，使用无菌接种针挖取适量砂土接种至斜面培养基上，28℃，40‑60%湿度培养7‑9天，向培养成熟的孢子斜面加入无菌水，使用无菌接种针轻轻刮下孢子，备用；b.种子罐菌体的培养：种子罐培养基成分为（g/100mL）：葡萄糖2‑3，黄豆饼粉2.5‑3.5，硫酸铵0.2‑0.4，硫酸镁0.03‑0.07，碳酸钙0.4‑1.0，磷酸二氢钾0.02‑0.08，豆油0.3‑0.8，消沫剂0.02‑0.05，种子罐培养温度30±1℃，向种子罐培养基上接种步骤a制备得到的孢子，接种量20‑30亿，通气比0.8‑1.0，罐压0.04±0.005Mp，溶氧控制在15%‑35%，繁殖菌体，当菌浓达到30%以上时进行移种，移种周期25‑30h，移种pH值控制在6.6‑7.0；c.发酵罐配方及控制：发酵罐培养基成分为（g/100mL）：淀粉5.0‑7.0，豆粉2.5‑3.5，硫酸铵0.5‑1.0，碳酸钙0.4‑1.0，磷酸二氢钾0.02‑0.08，氯化钠0.05‑0.10，豆油0.3‑0.8，消沫剂0.02‑0.05,发酵罐培养温度30±1℃，向发酵罐培养基上接种步骤b繁殖的菌体，接种量10%‑20%，通气比0.7‑0.9，罐压0.04±0.005Mp，全程流加氨水来调节pH值并补充氮源，通过调节搅拌转速和通气比来控制溶氧，放罐周期为180‑220h，发酵结束，即得到那西肽混悬液。