[发明专利]基于P-硝基苯丙氨酸插入法构建的骨质疏松疫苗

摘要

本发明公开了一种基于P-硝基苯丙氨酸插入法构建的骨质疏松疫苗，其特征在于通过如下步骤制备：1)RANKL重组表达载体的构建；2)非天然氨基酸p-硝基化苯丙氨酸编码序列的定点插入/置换；3)p-硝基化苯丙氨酸-RANKL蛋白的重组表达与纯化；4)动物免疫与筛选；5)基于血清中和检测及破骨细胞形成分析后的筛选；6)动物实验，确定所需疫苗。该方法有效突破机体对自体蛋白的免疫耐受，通过主动免疫手段，诱导机体产生针对RANKL的特异性中和抗体，实现对骨质疏松良好的防治；同时克服或绕过工业化生产抗体的高额成本问题。

主权项

一种基于P‑硝基苯丙氨酸插入法构建的骨质疏松疫苗，其特征在于通过如下步骤制备：1)RANKL重组表达载体的构建；2)非天然氨基酸p‑硝基化苯丙氨酸编码序列的定点插入/置换；3)p‑硝基化苯丙氨酸‑RANKL蛋白的重组表达与纯化；4)动物免疫与筛选；5)基于血清中和检测及破骨细胞形成分析后的筛选；6)动物实验，确定所需疫苗。