[发明专利]一种苹果绵蚜蜡腺孔观察方法

摘要

本发明公开了一种苹果绵蚜蜡腺孔观察方法，包括标本采集、苹果绵蚜初处理、脱脂处理、玻片标本制作、标本观察、数据分析等步骤；研究发现，苹果绵蚜各虫态体背均具有四列蜡腺孔，除中央两列每节各有一个蜡腺孔，两侧列除头部2、3节和腹部第8节无蜡腺孔外，其余每体节各有一个蜡腺孔，总计50个；每个蜡腺孔由若干蜡腺小孔呈梅花状排列组成，1、4列小孔数显著多于2、3列，腹部蜡腺孔小孔数目较其他部位蜡腺孔小孔数多，其中4-7节最多。本方法通过观察研究苹果绵蚜各虫态体背蜡腺孔的形态和排列特征快速鉴定苹果绵蚜，为苹果绵蚜的关卡检疫和防治提供实验依据，该方法具有准确性高、操作性强的优点，适用于关卡检疫中的快速检疫。

主权项

一种苹果绵蚜蜡腺孔观察方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）样本采集：于5～6月份苹果绵蚜危害期，选剪带有苹果绵蚜的枝条，剪下苹果叶仅留有叶柄，将处理好的苹果枝插入装有三分之二水的1000mL烧杯中，用纱布把烧杯口封住，放于阴凉通风处备用；（2）苹果绵蚜初处理：选取一个苹果绵蚜虫落，将覆盖在虫落上的绵絮去掉，用毛笔将虫落扫至培养皿中于解剖镜下分辩龄期，用体积浓度为70‑90%酒精反复冲洗苹果绵蚜3次，然后将各龄期苹果绵蚜分别放入指形管中，用体积浓度为70‑80%酒精浸渍24小时以上待用；（3）苹果绵蚜脱脂处理：将步骤2中不同龄期的苹果绵蚜从指形管中取出，用昆虫针在其腹部扎一小孔后于体积浓度为70‑80%酒精中浸泡24‑48h后冲洗干净，再于质量浓度为8‑15%的氢氧化钠溶液中恒温静置至虫体发白透明，蒸馏水清洗后再次在腹部扎另一小孔，于体积浓度为70‑80%酒精溶液中再次静置至虫体透明；（4）苹果绵蚜玻片标本的制作：取步骤3中透明的虫体放于凹玻片上，用蒸馏水冲洗3‑5次，吸水纸将水吸净后用染色剂染色5‑15分钟，再用蒸馏水将染色剂冲洗干净；虫体经整姿、干燥静置、压片、去泡透明后放于标本盒中待用；（5）玻片标本观察及数据处理：挑选1 ‑4龄若蚜、成蚜玻片标本各5枚，于双目实体显微镜下观察其蜡腺孔和小孔的数目及其分布规律，记录数据，实验数据用Excel进行处理并利用SPSS17.0统计学软件对实验数据进行多重比较。