[发明专利]一种应用于核酸扩增实时电化学pH检测的反应体系和检测方法

摘要

本发明提供了一种应用于核酸扩增实时电化学pH检测的反应体系及检测方法。所述反应体系为恒温扩增反应体系，含有引物、反应液、DNA聚合酶、和待检DNA；所述反应体系中的反应液含有TritonX-100、dNTP、甜菜碱、Mg²⁺、K⁺与NH₄⁺，反应体系的反应液中有额外添加的OH^-。本发明具有以下特点，本发明是利用对pH敏感的电化学传感器对核酸扩增进行实时检测：对于阴性样本，扩增反应过程中由于不产生质子因此反应前后pH无变化，而对于阳性样本，随扩增反应进行，氢离子作为副产物不断产生，因此反应前后pH发生变化；该反应液能够替代普通核酸扩增的反应缓冲液，不仅能保证核酸扩增正常进行，且对扩增过程中氢离子的产生足够敏感，产生明显的pH变化。

主权项

一种应用于核酸扩增实时电化学pH检测的反应体系，其为恒温扩增反应体系，含有引物、反应液、DNA聚合酶、和待检DNA；所述反应体系中的反应液含有Triton X‑100、dNTP、甜菜碱、Mg²⁺、K⁺与NH₄⁺，其特征在于所述反应体系的反应液中有额外添加的OH^‑。