[发明专利]生产MSTN双侧基因敲除的双肌性状体细胞克隆猪的方法有效
| 申请号： | 201410168615.5 | 申请日： | 2014-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN103952424B | 公开（公告）日： | 2017-01-11 |
| 发明（设计）人： | 尹熙俊;金奭中;金进秀;康锦丹 | 申请（专利权）人： | 尹熙俊 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N5/073;C12N15/877;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京青松知识产权代理事务所(特殊普通合伙)11384 | 代理人： | 郑青松 |
| 地址： | 133002 吉林省延*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明公开了生产MSTN双侧基因敲除的双肌性状体细胞克隆猪的方法，其利用高效简便的基因修饰技术TALEN技术，设计构建能高效敲除MSTN基因的质粒；通过电转染法转染猪胎儿成纤维细胞，磁珠分选阳性细胞作为供体细胞，化学辅助去核方法去核后进行体细胞核移植；经胚胎移植确定妊娠后26‑36天取出胎儿进行基因测序，以MSTN双侧基因敲除胎儿细胞作为供体细胞再次体细胞核移植，胚胎移植；足月分娩后免疫组化及形态学观察，确定为双肌性状克隆猪。获得MSTN‑/‑双侧敲除的双肌性状克隆公猪，取精液对发情母猪进行人工受精，获得大量双肌猪。本发明工艺简单，易于实施，且可产业化生产双肌猪，利于农业生产和医学研究。 | ||
| 搜索关键词： | 生产 mstn 基因 性状 体细胞 克隆 方法 | ||
【主权项】：
一种敲除MSTN双侧基因的TALENs基因表达盒，其特征在于，包含SEQ.NO.1～2所示的核酸序列。
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