[发明专利]纳米脂质体抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合IgY的制备方法及其制剂

摘要

本发明公开了一种纳米脂质体抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合IgY的制备方法及其制剂，制备方法包括：S1、分别制备复合抗原；S2、筛选产蛋禽类进行免疫，并分别拣取免疫蛋；S3、分别制两种复合抗原对应的特异性复合IgY粗提物；S4、制备复合纯IgY；S5、纳米化处理；S6、脂质体化处理。本发明的纳米脂质体抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合IgY，可特异性地识别致病菌幽门螺杆菌和幽门球菌以及相关酶和黏附素并穿透胃和十二指肠粘膜发生作用，一方面能直接抑制幽门螺杆菌和球菌，另一方面可抑制其相关酶和黏附素，阻断幽门螺杆菌在粘膜表面粘附和定植，达到根治的目的。

主权项

一种纳米脂质体抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合IgY的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、分别制备幽门螺杆菌和幽门球菌复合抗原，以及幽门螺杆菌尿素酶亚单位B、磷脂酶A₂、黏附素HpaA、黏附素SabA以及黏附素BabA2基因重组表达蛋白复合抗原； 所述幽门螺杆菌尿素酶亚单位B、磷脂酶A₂、黏附素HpaA、黏附素SabA以及黏附素BabA2基因重组表达蛋白复合抗原的制备包括：S1.4、采用基因工程技术将幽门螺杆菌尿素酶亚单位B、磷脂酶A₂、黏附素HpaA、黏附素SabA以及黏附素BabA2分别重组表达；S1.5、将分别重组表达获得的幽门螺杆菌尿素酶亚单位B、磷脂酶A₂、黏附素HpaA、黏附素SabA以及黏附素BabA2的重组蛋白按比例混合均匀，加入福氏佐剂，高速匀化处理形成油包水乳液，即制得幽门螺杆菌尿素酶亚单位B、磷脂酶A₂、黏附素HpaA、黏附素SabA以及黏附素BabA2基因重组表达蛋白复合抗原；S2、采用淘汰法筛选具有高免疫应答能力的产蛋禽类，分别采用两种所述复合抗原对所选的产蛋禽类进行免疫，并分别拣取两种所述复合抗原免疫的所述产蛋禽类所产的免疫蛋；S3、对两种所述免疫蛋进行消毒，分别取蛋黄，对蛋黄进行处理，制得两种所述复合抗原分别对应的抗幽门螺杆菌和幽门球菌特异性复合IgY粗提物和抗幽门螺杆菌尿素酶亚单位B、磷脂酶A₂、黏附素HpaA、黏附素SabA以及黏附素BabA2特异性复合IgY粗提物；S4、将两种所述特异性复合IgY粗提物分别进行纯化，分别得到对应的特异性复合纯IgY，并将两种所述特异性复合纯IgY按比例混合均匀，制得抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合纯IgY；S5、将所述抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合纯IgY干粉进行纳米化处理，以制得纳米化抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合纯IgY；S6、将所述纳米化抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合纯IgY进行脂质体化处理，制得纳米脂质体抗幽门螺杆菌和幽门球菌以及其相关酶和黏附素复合IgY。