[发明专利]一段重组基因及提高黑曲霉表达糖化酶的方法有效
| 申请号： | 201410173213.4 | 申请日： | 2014-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN103937766B | 公开（公告）日： | 2017-02-01 |
| 发明（设计）人： | 白挨玺;孙健;卞芙蓉;张垠;李峰;徐凤;徐红;潘金龙;章方良 | 申请（专利权）人： | 南京百斯杰生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/34 | 分类号： | C12N9/34;C12N15/52;C12N1/15;C12R1/685 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司32218 | 代理人： | 傅婷婷,夏平 |
| 地址： | 211100 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程领域，公开了一段重组基因及提高黑曲霉表达糖化酶的方法。一种提高黑曲霉表达糖化酶的方法，通过同源重组的方法，将糖化酶表达盒和选择标记基因定点整合到黑曲霉An12g08830基因座，再通过常规的抗性筛选和发酵培养重组黑曲霉获得糖化酶。本发明将糖化酶表达盒通过改进的同源重组方法定点整合到黑曲霉基因座An12g08830处后，不仅其转化效率和表达糖化酶活力显著升高，且省去了大量筛选转化子的过程。 | ||
| 搜索关键词： | 一段 重组 基因 提高 曲霉 表达 糖化酶 方法 | ||
【主权项】：
一种提高黑曲霉表达糖化酶的方法，其特征在于通过同源重组的方法，将糖化酶表达盒和选择标记基因定点整合到黑曲霉An12g08830基因座，再通过常规的抗性筛选和发酵培养重组黑曲霉获得糖化酶；所述的同源重组，需两段序列共同转化黑曲霉，第一段序列由An12g08830基因座5’侧翼序列与第一段选择标记基因连接，第二段序列由An12g08830基因座3’侧翼序列与糖化酶表达盒及第二段选择标记基因顺序连接，第一段序列与第二段序列在选择标记基因部分具有至少100bp的同源序列。
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