[发明专利]一种免疫磁珠的制备方法

摘要

本发明公开一种免疫磁珠的制备方法，首先取冷冻干燥过的硅基磁珠分散到极性有机溶剂中超声处理后，加入溶解于该极性有机溶剂中的分散剂，搅拌后，滴加溶解于该极性有机溶剂的带有双端羧基的有机小分子，滴加完毕后反应6~18h；反应结束后，磁分离出羧基磁珠，依次用无水乙醇及去离子水反复洗涤沉淀物数次至洗涤液pH值为6～7，超声处理15～30min，分散在万分之二NaN₃水中，即得到羧基磁珠；羧基磁珠用MES缓冲液清洗至少一次，重悬羧基磁珠于MES缓冲液中，通过活化剂碳二亚胺将磁珠活化后，在MES缓冲液环境中偶联抗体。本发明工艺流程简单，操作简便，适于批量化生产。

主权项

一种免疫磁珠的制备方法，其特征是：其包括以下步骤：S1、羧基磁珠的制备取冷冻干燥过的硅基磁珠2~100 g分散到0.2~3L极性有机溶剂中超声处理30～60min后，加入溶解于该极性有机溶剂中的分散剂10～100ml，分散剂浓度为10～50g/L，搅拌30~60min后，滴加溶解于该极性有机溶剂的带有双端羧基的有机小分子30～500ml，带有双端羧基的有机小分子浓度为4~20g/L，控制滴加速度为0.1～0.5ml/min，体系温度为60～80℃，滴加完毕后反应6~18h；反应结束后，磁分离出羧基磁珠，依次用无水乙醇及去离子水反复洗涤沉淀物数次至洗涤液pH值为6～7，超声处理15～30min，分散在万分之二NaN₃水中，即得到羧基磁珠；S2、免疫磁珠的制备上述步骤S1中所得的羧基磁珠用MES缓冲液清洗至少一次，重悬（1～20）mg羧基磁珠于200μl MES缓冲液中，通过活化剂碳二亚胺将磁珠活化后，在MES缓冲液环境中偶联抗体，羧基磁珠与活化剂碳二亚胺按照（4～10）：1的体积比。