[发明专利]一种青藏高原藏羊mtDNA Cytb全序列合成方法在审
| 申请号： | 201410187687.4 | 申请日： | 2014-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN103952421A | 公开（公告）日： | 2014-07-30 |
| 发明（设计）人： | 刘建斌;孙晓萍;王凡;曾玉峰;郭健;岳耀敬;杨博辉;张万龙;郎侠;冯瑞林;郭婷婷;牛春娥;王宏博 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 730050 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种青藏高原藏羊mtDNACytb全序列合成方法，包括以下步骤:（1）绵羊线粒体Cytb全序列的收集及与近缘线粒体Cytb序列的比对；（2）引物设计与PCR扩增；（3）PCR产物测序与序列组装。本发明获得了青藏高原15个藏羊地方品种642个个体的mtDNA Cytb全序列。本发明的检测方法具有速度快、成本低、易掌握等优点，所获得的mtDNA Cytb全序列可应用于青藏高原藏羊遗传资源多样性评估、遗传变异分析、系统进化分析、母系起源和系统发育研究及种质资源鉴定与保护等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 青藏高原 mtdna cytb 序列 合成 方法 | ||
【主权项】：
一种青藏高原藏羊mtDNA Cytb全序列合成方法，其特征是，包括以下步骤：（1）绵羊mtDNA Cytb 全序列的收集与分析：收集绵羊mtDNA Cytb全序列，并与近缘种的mtDNA Cytb全序列进行比对，分析mtDNA Cytb全序列在近缘种的mtDNA全基因组序列上的相对位置；（2）引物设计与PCR扩增：根据mtDNA Cytb基因在近缘种全基因组序列保守区域设计上、下游PCR引物，采用PCR方法扩增相邻的两个已知序列的未知序列，其中，PCR引物和测序引物1对，其引物序列为：Forward primer：5’‑TGAAGAAAACCCCACAAAACCT ‑3’Reverse primer：5’‑TTGGGTGTTGATAGTGGGGC‑3’；（3） PCR产物测序与序列组装：通过PCR产物测序反应体系对PCR产物进行测序、序列分析，将mtDNA Cytb序列进行组装，获得mtDNA Cytb全序列。
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