[发明专利]从谷氨酸棒状杆菌菌渣中提取胞壁酸的方法及检测方法有效
申请号: | 201410188150.X | 申请日: | 2014-05-06 |
公开(公告)号: | CN103954726A | 公开(公告)日: | 2014-07-30 |
发明(设计)人: | 蒋新英;刘代成 | 申请(专利权)人: | 山东师范大学 |
主分类号: | G01N30/90 | 分类号: | G01N30/90;C07H15/04;C07H1/08 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 彭成 |
地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种胞壁酸的薄层层析扫描检测方法,具有简单、快速、准确、可靠、稳定等优点,步骤为:1)取待检测样品液,点样于高效薄层硅胶板上,同时,将标准液点样于同一块高效薄层硅胶板;展开剂加入展开缸中进行预平衡,后将高效薄层硅胶板放入展开缸中进行二次展开,取出晾干;2)烘烤染色;3)利用薄层扫描仪进行薄层层析扫描,得到胞壁酸Rf(比移值)和峰面积积分值;同时,计算出标准液质量和峰面积积分值的关系的回归方程,然后根据样品液的峰面积积分值计算出样品液中胞壁酸的质量浓度。本发明还提供了一种从谷氨酸棒状杆菌菌渣中提取胞壁酸的方法,通过洗涤、脱脂、酸解、萃取等对菌渣的各种处理,得到了纯化的胞壁酸。 | ||
搜索关键词: | 谷氨酸 杆菌 菌渣中 提取 胞壁酸 方法 检测 | ||
【主权项】:
一种胞壁酸的薄层层析扫描检测方法,其特征在于:步骤如下:1)取待检测样品液,点样于高效薄层硅胶板上,同时,将不同浓度的标准液点样于同一块高效薄层硅胶板;展开剂加入展开缸中进行预平衡,后将高效薄层硅胶板放入展开缸中进行二次展开,取出晾干;所述展开剂为甲醇‑丙酮‑乙酸‑水‑异丙醇混合液,其中,甲醇、丙酮、乙酸、水、异丙醇五者的体积比为4~6:2~4:0.5~1:0.5~1:0.5~2;2)将质量浓度为1%的茚三酮乙醇溶液喷到高效薄层硅胶板上进行烘烤染色;3)利用薄层扫描仪进行薄层层析扫描,得到胞壁酸Rf(比移值)和峰面积积分值;同时,计算出标准液质量和峰面积积分值的关系的回归方程,然后根据样品液的峰面积积分值计算出样品液中胞壁酸的质量浓度。
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