[发明专利]一种植物源靶向植源乳酸菌的制备方法

摘要

本发明具体涉及一种植物源靶向植源乳酸菌的制备方法。对其进行温度控制和适应性驯化，驯化采用时间和温度相结合控制的方法，大大提高了植源乳酸菌制备的高活性、安全性，适应性，并且操作简便，降低了技术成本，提高植源乳酸菌适应性能力。一种植物源靶向植源乳酸菌的制备方法为(1)将通过筛选的植物源菌株CCTCC No.M204051进行常规斜面培养活化和种子培养，得到种子培养液，对种子培养液进行不高于45度的温度控制，添加种子培养液体积百分比2%—5%的柠檬酸进行适应性训化；(2)然后配制发酵培养基，并经灭菌后接种芽孢杆菌菌种和上述种子培养液，再用高速剪切机进行剪切，得到菌落；(3)然后对菌落进行太阳能、外加热源发酵，得到菌泥；(4)对菌泥进行膜包覆处理和干燥。

主权项

一种植物源靶向植源乳酸菌的制备方法：其特征在于：所述的制备方法为：(1)将通过筛选的保藏号为CCTCC No.M204051的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）HSC235进行常规斜面培养活化和种子培养，得到种子培养液，对种子培养液进行不高于45度的温度控制，添加种子培养液体积百分比2%—5%的柠檬酸进行适应性驯化；所述的筛选方法为在含亚油酸的MRS培养基上厌氧条件下培养1天～4天，温度为27.5℃～38℃，pH值为6.0～6.6；(2) 然后配制发酵培养基，并经灭菌后接种芽孢杆菌菌种和上述种子培养液，再用高速剪切机进行剪切，得到菌落；(3) 然后对菌落进行太阳能或外加热源发酵，得到菌泥；(4) 对菌泥收集和干燥；所述的步骤（2）中的发酵培养基的配方为：蛋白胨5‑12g/L、酵母膏2‑5g/L、牛肉膏1‑3g/L、葡萄糖2‑8g/L、乙酸钠2‑8g/L、吐温80 1—5g/L、硫酸铁1‑3g/L、硫酸锰1‑3g/L、柠檬酸三胺2—5g/L，亚油酸8g/L，余量为水；所述的步骤（2）和(3)的工艺流程中：a.接种子液，接种量为发酵培养基溶液体积比的5％～15％，种子液的光密度为1～3；b.发酵过程中，长菌温度为28℃～30℃，时间为60h～66h；c.采取慢速加糖方式，总发酵液体积为10升，加糖量为100g‑350g，且在接种后6h开始，在48h内加完；d.上述发酵培养基中亚油酸不能直接加入，而经与分散剂混合后才能加入，且控制发酵液中亚油酸的浓度，采用缓慢加入的方式；e.发酵过程中采用添加氢氧化钠和盐酸自动平衡调节pH值，使pH值维持在6.0～6.6之间；所述的步骤（4）菌泥收集和干燥：发酵液通过高速冷冻离心机用去离子无菌水洗涤三次，洗涤时转子的速度为7000转/分，时间为20min，温度为4℃，离心收集细胞，加保护剂，真空冷冻干燥，即得植物乳酸菌；所述的保护剂为甘油、脱脂奶粉、海藻糖或甘露醇；所述的分散剂为乙醚；所述的步骤d中亚油酸的浓度30%‑50%。