[发明专利]制备克隆小型动物胚胎的方法有效
申请号: | 201410189550.2 | 申请日: | 2014-05-06 |
公开(公告)号: | CN105087653B | 公开(公告)日: | 2019-01-08 |
发明(设计)人: | 陈玉;李杏;李林;杨珍珍;杜玉涛 | 申请(专利权)人: | 深圳华大方舟生物技术有限公司;深圳华大基因科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/877 | 分类号: | C12N15/877 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 518083 广东省深圳市盐*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了制备克隆小型动物胚胎的方法,其包括以下步骤:提供离体的供体核细胞;提供离体的卵母细胞;于含有透明带消化剂的卵母细胞去核液中,将卵母细胞进行去核处理,以便获得去核卵母细胞;将去核卵母细胞与供体核细胞融合,以便获得重构胚;将重构胚进行体外激活,以便获得激活的重构胚;以及将激活的重构胚进行培养,以便获得克隆小型动物胚胎。采用本发明的方法,能够在消化卵母细胞透明带的同时,适时快速进行切割去核,从而操作人员可以精确的把握去核时间,成功实现卵母细胞去核,并保证囊胚形成率,高效制备克隆小型动物胚胎。 | ||
搜索关键词: | 制备 克隆 小型 动物 胚胎 方法 | ||
【主权项】:
1.一种制备克隆小型动物胚胎的方法,其特征在于,包括以下步骤:提供离体的供体核细胞;提供离体的卵母细胞;于含有透明带消化剂的卵母细胞去核液中,将所述卵母细胞进行去核处理,以便获得去核卵母细胞;将所述去核卵母细胞与所述供体核细胞融合,以便获得重构胚;将所述重构胚进行体外激活,以便获得激活的重构胚;以及将所述激活的重构胚进行培养,以便获得所述克隆小型动物胚胎,所述小型动物为鼠科、兔科、猫科、或犬科的至少一种;所述透明带消化剂为链蛋白酶和细胞松弛素B;所述卵母细胞去核液中包含:5‑15μg/mL链蛋白酶;和1‑5μg/mL细胞松弛素B。
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