[发明专利]一种用于评估雷公藤肝毒性的生物毒性效价检定方法

摘要

一种用于评估雷公藤肝毒性的生物毒性效价检定方法，所述毒性效价生物检定法可以准确、快速地检定雷公藤的整体毒性，对药材进行统一的毒性效价标示。在药材生产、加工、销售等环节，毒性效价检定可以作为药材质量控制的手段之一。在临床上，医生可以根据药材的标示毒性效价调整用药剂量，从而保证用药安全。

主权项

一种用于评估雷公藤肝毒性的生物毒性效价检定方法，所述生物毒性效价检定方法包括以下步骤：a.配制供试品溶液和供试品稀释液制备雷公藤的干浸膏；在测定前，用细胞培养液将所述干浸膏配置成供试品溶液，过滤除菌，备用；测定时，估计供试品毒性效价，用所述细胞培养液稀释所述供试品溶液，得到不同浓度的供试品稀释液；b.配制对照品溶液和对照品稀释液用所述细胞培养液将具有肝细胞毒性的对照品配制成对照品溶液，过滤除菌，贮存，备用；测定时，用所述细胞培养液稀释所述对照品溶液，得到不同浓度的对照品稀释液；c.测定以正常人肝细胞作为供试细胞，将所述肝细胞接种于细胞培养板中，并在培养箱内培养12～48小时，吸出细胞培养液，加入所述对照品稀释液或所述供试品稀释液，放入培养箱内孵育，之后吸出培养板内的所述对照品稀释液或供试品稀释液，加入CCK‑8，优选地加入体积比为10％的CCK‑8，继续培养30～60分钟后，检定波长在450nm下的吸光度，计算细胞抑制率；d.生物毒性效价计算以细胞抑制率为评价指标且对给药浓度取对数，按照2010年版《中国药典》生物检定统计法项下的量反应平行线法(2·2)计算雷公藤样品的毒性效价及实验误差，可信限率FL％不得超过40％，优选地不超过20％，其中，所述细胞培养液是在常规方法中用于培养肝细胞的细胞培养液。