[发明专利]一种手性N-保护哌啶醇的生物制备方法

摘要

本发明涉及一组重组酮还原酶的蛋白序列，以及利用该系列酮还原酶制备手性N-保护哌啶醇的方法，其以N-保护哌啶酮为底物，使该底物在重组酮还原酶、辅因子及异丙醇的存在下发生不对称还原反应生成手性N-保护哌啶醇，所述不对称还原反应在pH为7.0~9.0的水相缓冲液中、温度20℃~45℃下进行。本发明方法通过采用特定的重组酮还原酶来代替现有生物法所用的来源不稳定的催化剂，成功制备出光学纯度高的手性N-保护哌啶醇。该方法反应条件温和，反应效率高，操作简便，特别是，反应底物的浓度可提高至10%以上，大大提高了制备手性N-保护哌啶醇的效率和降低了反应的成本，具有重要的实际工业应用价值。

主权项

一种手性N‑保护哌啶醇的生物制备方法，所述手性N‑保护哌啶醇的结构式如下：其中R代表保护基；其特征在于：所述方法以N‑保护哌啶酮为底物，使该底物在生物催化剂、辅因子及氢供体的存在下发生不对称还原反应生成手性N‑保护哌啶醇，所述生物催化剂为重组酮还原酶，所述重组酮还原酶由氨基酸序列如SEQ ID No.1～25中任一项所示的酮还原酶重组得到，所述的氢供体为异丙醇，所述不对称还原反应在pH为7.0～9.0的水相缓冲液中、温度20℃～45℃下进行。